[發明專利]一種防治果蔬根腐病的地衣芽孢桿菌Z-13菌株及其應用

有效

• 申請號: 202110055949.1
• 申請日: 2021-01-15
• 公開（公告）號: CN112852665B
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發明（設計）人: 張冬冬;肖嘉文;張學超;陳曉萌
• 申請（專利權）人: 河北冀微生物技術有限公司;河北農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P3/00;A01P21/00;A01G13/00;C12R1/10
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 郝曉紅

本發明涉及一種防治果蔬根腐病的地衣芽孢桿菌Z?13菌株及其應用，該菌株已于2020年9月25日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC No.20823；保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。該地衣芽孢桿菌Z?13菌株對引起果蔬根腐病的常見病原菌具有顯著的拮抗作用，能夠有效防治果蔬根腐病。同時，該地衣芽孢桿菌Z?13菌株還具有較強的產生3?吲哚乙酸和嗜鐵素的能力，能夠促進植物對營養物質的吸收，從而促進植物生長。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，特別是涉及一種防治果蔬根腐病的地衣芽孢桿菌Z-13菌株及其應用。

背景技術

根腐病是設施果蔬生產上危害最為嚴重的土傳病害之一，尤其以黃瓜、番茄等葫蘆科和茄科蔬菜根部病害尤為嚴重，一般會導致產量損失10％-15％以上，有時可達30％-40％以上，甚至絕收。根腐病主要發生在植株的莖基部和根部，在整個生育期均可發病，侵害植株根部維管組織使植株死亡，其中鐮孢菌(Fusarium spp.)引發的根腐病尤為常見。據報道尖孢鐮孢菌(F.oxysporium)是引起土傳病害的優勢種群。

目前，蔬菜根部病害的防治仍以化學防治為主，但由于高毒、高殘留、污染環境等諸多弊端，越來越多的化學農藥被逐漸限制使用。生物防治綠色環保，病原菌不易產生耐藥性。生防菌劑生產工藝較簡單、且能促進作物生長，應用前景廣闊。

發明內容

針對化學防治蔬菜根部病害具有高毒、高殘留、污染環境等諸多弊端的技術問題，本發明提供一種防治果蔬根腐病的地衣芽孢桿菌Z-13菌株及其應用。該地衣芽孢桿菌Z-13菌株對引起果蔬根腐病的常見病原菌具有顯著的拮抗作用，并具有較強的產生3-吲哚乙酸(IAA)和嗜鐵素的能力，既能夠有效防治果蔬根腐病，又能夠促進植物對營養物質的吸收，促進植物生長。

為解決上述技術問題，本發明實施例采用了如下的技術方案：

一方面，本發明實施例提供一種防治果蔬根腐病的地衣芽孢桿菌Z-13菌株，其分類名稱為地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)，于2020年9月25日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC No.20823；保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

本發明所提供的地衣芽孢桿菌Z-13菌株從非感病地塊黃瓜根際土壤中分離得到，屬于芽孢桿菌屬，其對引起果蔬根腐病的常見病原菌具有顯著的拮抗作用，能夠有效防治果蔬根腐病。同時，該地衣芽孢桿菌Z-13菌株還具有較強的產生3-吲哚乙酸(IAA)和嗜鐵素的能力，能夠促進植物對營養物質的吸收，從而促進植物生長。其16S rDNA序列如SEQ IDNO.1所示。

該地衣芽孢桿菌Z-13菌株的篩選方法具體包括以下步驟：

①取未感病地塊的黃瓜根際土壤中分離產芽孢細菌，然后從中篩選對尖孢鐮刀菌有抑制作用的拮抗菌菌株；

②將步驟①得到的拮抗菌菌株在NA斜面培養基上活化，將活化的菌株接種于NB培養基，37℃恒溫振蕩培養過夜。離心收集菌體，用無菌水洗滌并重懸于等體積的Msgg培養基中。吸取Msgg培養基菌懸液在37℃靜置培養，從中篩選出具有顯著的生物膜生成能力的拮抗菌菌株；

③將步驟②得到的拮抗菌菌株轉接到NB培養基中，37℃搖床振蕩培養24h后再轉接到YMA培養基中，37℃搖床振蕩培養4d。取培養菌液以10000r/min離心15min，取上清液，加入等量PC比色液，在黑暗中靜置0.5h，以培養基為對照，通過分光光度法篩選出具有產生IAA能力的拮抗菌菌株；

④將步驟②得到的拮抗菌菌株點接在CAS藍色定性檢測培養基上，37℃恒溫培養箱中倒置培養3d，篩選出具有產生嗜鐵素能力的拮抗菌菌株；從中選擇既能產生IAA、又能產生嗜鐵素的拮抗菌菌株；