[發明專利]用于特異性結合RANKL靶向治療藥物的抗體及其用途

有效

• 申請號: 202110054251.8
• 申請日: 2021-01-15
• 公開（公告）號: CN112679614B
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: 張麗;林長征;何婉玲;汪波;王笑非
• 申請（專利權）人: 廣東安普澤生物醫藥股份有限公司
• 主分類號: C07K16/42
• 分類號: C07K16/42;C12N15/13;G01N33/577
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 劉婉

本發明提供了一種特異性結合RANKL靶向治療藥物的抗體，所述抗體由2條相同的重鏈和2條相同的輕鏈組成，其中重鏈的可變區具有三個抗原決定簇區域，所述重鏈的可變區的三個抗原決定簇區域的氨基酸序列如SEQ ID NO.3、4、5所示；所述輕鏈的可變區具有三個抗原決定簇區域，所述輕鏈的可變區的三個抗原決定簇區域的氨基酸序列自如SEQ IDNO.6、7、8所示。本發明的抗體能夠與地舒單抗特異性結合，從而有效、準確地定性、定量檢測血清中的地舒單抗。

技術領域

本發明屬于生物化學領域，具體涉及一種用于特異性結合RANKL靶向治療藥物(如地舒單抗和/或其類似物)的抗體、含有該抗體的試劑盒、編碼該抗體的核苷酸序列、含有該核苷酸序列的載體、用于制備特異性結合RANKL靶向治療藥物的抗藥抗體的檢測試劑的用途、以及用于檢測RANKL靶向治療藥物的抗藥抗體的方法。

背景技術

地舒單抗(Denosumab)是美國安進(Amgen)公司生產的用于抗骨質疏松和抗骨癌轉移的單克隆抗體，該抗體可以特異性結合核因子-κB受體活化因子配體(Receptoractivator of nuclear factor kappa-B ligand，RANKL)，從而阻斷RANKL與其膜受體RANK的結合，阻斷RANKL-RANK在破骨細胞中的信號轉導活化信號。

地舒單抗在用藥過程中可能誘發一定程度的抗藥性抗體(ADA)，這些抗體可能是無害的、降低藥效的、降低藥物半衰期的、或危及生命的。FDA(美國食品和藥物管理局)和EMA(歐洲藥品管理局)都建議并提供指導，在早期和晚期臨床試驗期間對治療蛋白產品進行免疫原性試驗，以了解ADA對給定藥物的影響。ADA的評估和表征是評估生物藥物安全性的重要方面。目前最流行的ADA檢測方法是基于MSD電化學發光的橋接分析，它提供了穩健和敏感的分析方案，但操作復雜，且不夠靈敏。

發明內容

本發明的目的在于針對以上要解決的技術問題，提供一種能夠與RANKL靶向治療藥物特異性結合、從而有效并準確檢出血清中存在的RANKL靶向治療藥物的抗藥抗體。

為實現上述目的，本發明提供了一種特異性結合RANKL靶向治療藥物的抗體，所述抗體由2條相同的重鏈和2條相同的輕鏈組成，所述重鏈的可變區具有三個抗原決定簇區域，所述重鏈的可變區的三個抗原決定簇區域的氨基酸序列如SEQ ID NO.3、4、5所示；所述輕鏈的可變區具有三個抗原決定簇區域，所述輕鏈的可變區的三個抗原決定簇區域的氨基酸序列如SEQ ID NO.6、7、8所示。

優選地，所述RANKL靶向治療藥物包括但不限于地舒單抗，優選是地舒單抗或其類似物。

所述抗體優選是通過小鼠免疫方法得到的鼠源單克隆抗體。

作為一種優選的實施方案，所述重鏈的可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述輕鏈的可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本發明還提供了一種試劑盒，其含有所述抗體。優選地，該試劑盒還包括洗滌液、顯色液和終止液。

本發明還提供了編碼所述抗體的核苷酸序列。

本發明還提供了包含所述載體、用于表達所述抗體的宿主細胞。

另一方面，本發明還提供了所述抗體用于制備檢測RANKL靶向治療藥物的抗藥抗體的分子診斷試劑的用途。

另一方面，本發明還提供了一種用于檢測RANKL靶向治療藥物的抗藥抗體的方法，特別是檢測血清中存在的RANKL靶向治療藥物的抗藥抗體的方法，其采用所述的抗體作為標準品。

優選地，根據所述方法，檢測濃度的靈敏度為50ng/ml，檢測上限為3200ng/ml。

將本發明的抗體作為標準品，能夠有效、準確地檢測血清中存在的RANKL靶向治療藥物的抗藥抗體。

附圖說明