[發明專利]6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器及其在菌株篩選中的應用有效
| 申請號： | 202110050546.8 | 申請日： | 2021-01-14 |
| 公開（公告）號： | CN112779278B | 公開（公告）日： | 2022-04-19 |
| 發明（設計）人： | 劉龍;陳堅;呂雪芹;武耀康;盧健行;堵國成;李江華;劉長峰 | 申請（專利權）人： | 江南大學;山東潤德生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/75 | 分類號： | C12N15/75;C12N15/65;C12N15/64;C12N15/90;C12N1/21;C12P19/26;C12R1/125 |
| 代理公司： | 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 磷酸 氨基 葡萄糖 生物 傳感器 及其 菌株 篩選 中的 應用 | ||
1.一種6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器，其特征在于，所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器整合表達在枯草芽孢桿菌的基因組上，包括轉錄因子GamR、包括GamR結合位點的啟動子、采用包括GamR結合位點的啟動子來表達的T7 RNA聚合酶，以及采用T7啟動子來表達的熒光蛋白；
所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器還包括采用核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的RBS調控T7 RNA聚合酶的表達強度；
所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器還包括在包括GamR結合位點的啟動子上添加阻遏蛋白LacI的結合位點lacO；
所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器還包括在T7啟動子的下游添加轉錄因子GamR的結合位點gamO。
2.根據權利要求1所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器，其特征在于，所述的包括GamR結合位點的啟動子為P
3.根據權利要求1所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器，其特征在于，整合表達的位點為枯草芽孢桿菌基因組的
4.權利要求1~3任一項所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物傳感器在高通量篩選微生物菌株中的應用，其特征在于，所述的應用是篩選高產6-磷酸氨基葡萄糖、N-乙酰氨基葡萄糖、神經氨酸或透明質酸的枯草芽孢桿菌。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，在應用過程中，先將枯草芽孢桿菌中將6-磷酸氨基葡萄糖轉化為N-乙酰氨基葡萄糖、神經氨酸或透明質酸的酶的基因消除，篩選得到6-磷酸氨基葡萄糖產量高的菌株后，再轉入相關的基因。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，在篩選高產N-乙酰氨基葡萄糖的枯草芽孢桿菌過程中，先消除磷酸氨基葡萄糖乙酰化酶基因。
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