[發明專利]誘導間充質干細胞釋放促進皮膚上皮細胞分化特定功能外泌體的組合物及其應用

有效

• 申請號: 202110046906.7
• 申請日: 2021-01-14
• 公開（公告）號: CN112795535B
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發明（設計）人: 沈麗
• 申請（專利權）人: 北京臻膳美科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;C12N5/071;A61K35/28;A61P17/18;A61P17/00;A61K8/99;A61Q19/08
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 任鳳華

本發明公開了誘導間充質干細胞釋放促進皮膚上皮細胞分化特定功能外泌體的組合物及其應用。該組合物含有ROCK抑制劑、表皮生長因子和活性肽。該特定功能外泌體具有下述至少一種功能：1)促進皮膚成纖維細胞向上皮細胞分化，2)促進光損傷皮膚修復和/或促進光老化損傷皮膚修復，3)抵抗皮膚的光損傷和/或光老化損傷，4)提高皮膚抗氧化能力。該特定功能的外泌體可通過皮膚表皮涂抹或無針注射無創導入損傷皮膚細胞和組織內，參與皮膚的修復，具有預防和/或治療光損傷老化的功效，可成為皮膚康復的無細胞替代治療的生物類藥物。

技術領域

本發明涉及生物醫學領域，涉及誘導間充質干細胞釋放促進皮膚上皮細胞分化特定功能外泌體的組合物及其應用。

背景技術

外泌體(exosome)是細胞內吞過程的末端產物，由脂質雙層膜形成的細胞器來結構。體內所有的細胞都具備產生和分泌外泌體的功能。通常細胞通過胞吞將外源性物質形成內吞小泡進入細胞質內，在高爾基體等細胞器的作用下，以出芽形成早期胞內體(earlyendosomes)，選擇性地接受細胞內的蛋白質、核酸、脂類等生物活性成分，再次出芽形成晚期胞內體(late endosomes)，最終形成多囊泡(multivesicular bodies,MVB)與細胞膜融合，以胞吐的形式排放小囊泡，直徑約在30-150nm，稱為外泌體。外泌體包含的成分與來源細胞相似，富含蛋白質，活性多肽，脂類和mRNAs、miRNAs、lncRNAs等核酸分子。外泌體通過細胞之間的通訊，可介導細胞內信號調控，直接激活靶細胞，使靶細胞發生一系列生物學效應。外泌體具有歸巢機制改變損傷組織的微環境，修復損傷。

間充質干細胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)有多種組織來源，包括骨髓、脂肪組織、牙髓、臍血、羊水、胎盤、羊膜、臍帶華通氏膠等。各種來源的間充質干細胞均具有克隆化生長、自我更新和多潛能分化的能力。間充質干細胞可通過分化作用成為相應組織的細胞，修復損傷組織，起到替代作用。間充質干細胞還具有旁分泌因子效應，可以促進損傷組織的自身修復。間充質干細胞具有免疫原性較低和免疫調節功能，具有臨床應用安全性。因此，已有大量的研究報道，各種來源的間充質干細胞治療皮膚損傷，包括皮膚創面愈合、皮膚切割傷口愈合、皮膚燒傷的治療等。然而由于間充質干細胞的大小在10-25μm之間，不能無創透膜，在皮膚的應用過程中存在局限性。

皮膚暴露身體表面易受干燥、紫外線及有毒物質等環境因素傷害，受損皮膚引發的老化、皮炎、濕疹等皮膚問題，會影響生活質量。間充質干細胞分泌的外泌體基于納米級(30-150nm)大小特性、無免疫原性、無致瘤性及與干細胞類似的生物學功能等，也有大量研究報道。其中不乏采用轉基因、乏氧、小分子誘導等方法獲得特異功能的細胞釋放外泌體的研究報道。

盡管皮膚是人體再生能力較強的器官，但光老化損傷、年齡相關的皮膚變薄松弛、毛細血管擴張、皺紋形成等諸多問題仍需具有特定功能的干細胞衍生外泌體的干預治療。外泌體通過無針注射可以無創導入損傷皮膚細胞和組織內，參與皮膚的修復，有望成為皮膚康復的無細胞治療生物類藥物。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何誘導間充質干細胞釋放特定功能外泌體。所述特定功能外泌體具有下述至少一種功能：1)促進皮膚成纖維細胞向上皮細胞分化，2)促進光損傷皮膚修復和/或促進光老化損傷皮膚修復，3)抵抗皮膚的光損傷和/或光老化損傷，4)提高皮膚抗氧化能力。

為了解決以上技術問題，本發明提供了誘導間充質干細胞釋放外泌體的組合物。

本發明所提供的誘導間充質干細胞釋放外泌體的組合物，含有選擇性Rho相關卷曲螺旋形成蛋白激酶(selective inhibitor of Rho-associated,coiled-coilcontaining protein kinase，ROCK)抑制劑、表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)和活性肽。