[發(fā)明專利]一種復(fù)合微生物制劑及其在防治疫霉中的用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110044866.2
• 申請日: 2018-04-02
• 公開（公告）號: CN112592840B
• 公開（公告）日: 2022-08-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葉志堅;周競夫;齊曄;朱錫杭;朱增湖
• 申請（專利權(quán)）人: 山東土木啟生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/16;C12N1/20;A01N63/32;A01N63/27;A01N63/22;A01P3/00;C12R1/01;C12R1/125;C12R1/885;C12R1/645
• 代理公司: 深圳市洪荒之力專利代理有限公司 44541
• 代理人: 莊露露

1.一種復(fù)合微生物制劑在防治辣椒疫霉中的應(yīng)用，其特征在于，所述復(fù)合微生物制劑按照如下工藝制備而得：將康氏木霉（Trichoderma-Koningii）-絲孢酵母（Trichosporonsp.）混合發(fā)酵液、沼澤紅假單胞菌（Rhodopseudomonas palustris）發(fā)酵液、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）發(fā)酵液按照5-8:2-3:2-3的體積比混合均勻，然后真空冷凍干燥制得菌粉，即得；

所述康氏木霉-絲孢酵母混合發(fā)酵液按照如下步驟制備而得：

1）將絲孢酵母劃線接種在YPDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到單菌落；挑取單菌落接種到Y(jié)PD液體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，30℃培養(yǎng)24h，得到絲孢酵母種子液，待用；

2）將康氏木霉劃線接種在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到單菌落；挑取單菌落接種到PDA液體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，30℃、200rpm搖床培養(yǎng)36h，得到康氏木霉種子液，待用；

3）先將康氏木霉種子液按照10%的接種量接入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，30℃培養(yǎng)6小時，然后將絲孢酵母種子液按照5%的接種量接入到發(fā)酵培養(yǎng)基，繼續(xù)以30℃培養(yǎng)18小時，得到康氏木霉-絲孢酵母混合發(fā)酵液；

所述沼澤紅假單胞菌發(fā)酵液按照如下步驟制備而得：

將沼澤紅假單胞菌在LB平板上劃線培養(yǎng)，得到單菌落；挑取單菌落接入種子培養(yǎng)基上培養(yǎng)至對數(shù)生長期，培養(yǎng)條件為：30-32℃，光照3000-4000Lux，制成種子液；然后按照10%的接種量接入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，30-32℃培養(yǎng)24h，得到沼澤紅假單胞菌發(fā)酵液；

所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液按照如下步驟制備而得：

將枯草芽孢桿菌在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，得到單菌落；挑取單菌落接入種子培養(yǎng)基上，30℃、200rpm搖床培養(yǎng)至對數(shù)生長期，制成種子液；然后按照8%的接種量接入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，30℃培養(yǎng)36h，得到枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；

所述康氏木霉為康氏木霉ATCC66766，所述絲孢酵母為絲孢酵母ATCC201110，所述沼澤紅假單胞菌為沼澤紅假單胞菌ATCC17001，所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌ATCC6633。