[發(fā)明專(zhuān)利]一種云杉種子完全滅菌技術(shù)有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110037775.6 | 申請(qǐng)日： | 2021-01-12 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN112772047B | 公開(kāi)（公告）日： | 2022-09-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 尹春英;唐小樂(lè);劉慶華 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 中國(guó)科學(xué)院成都生物研究所 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | A01C1/08 | 分類(lèi)號(hào)： | A01C1/08 |
| 代理公司： | 成都坤倫厚樸專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 51247 | 代理人： | 吳亦雨 |
| 地址： | 610041 四川*** | 國(guó)省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 云杉 種子 完全 滅菌 技術(shù) | ||
本發(fā)明屬于種子處理領(lǐng)域，具體涉及一種云杉種子的完全滅菌技術(shù)。具體技術(shù)方案為：使用1％～10％，w/v，的AgNO3溶液浸泡種子5～30min。使用特定培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌操作，所述培養(yǎng)皿至少包括兩層，其中一層為可盛放待滅菌種子的處理層，各層間可控進(jìn)行液體流通。本發(fā)明首次提供了一種可用于云杉種子完全滅菌方法，滅菌效果高達(dá)100％；并基于該方法提供了一種種子萌芽方法，發(fā)芽率高達(dá)90％以上。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于種子處理領(lǐng)域，具體涉及一種云杉種子的完全滅菌技術(shù)。
背景技術(shù)
為了研究云杉種子內(nèi)生菌對(duì)種子萌發(fā)和幼苗定植的影響，首要解決的問(wèn)題是消滅種子表面的微生物。其次，為了比較在內(nèi)生菌缺失的情況下種子的萌發(fā)以及幼苗定植的情況，就需要連同殺滅種子內(nèi)部的微生物。同時(shí)為了確定特定微生物對(duì)種子萌發(fā)及隨后植物生長(zhǎng)的影響，在有意引入特定的微生物前也應(yīng)當(dāng)消滅未經(jīng)確認(rèn)的種子微生物。但由于種子完全滅菌技術(shù)的局限性，相同的滅菌劑、滅菌濃度以及滅菌時(shí)間對(duì)不同種子完全的微生物會(huì)有不同的滅菌效果，而且一般滅菌劑通常會(huì)對(duì)種子萌發(fā)造成傷害。對(duì)于云杉種子，目前較多的是采用0.3％的K2MnO4溶液浸泡15min，進(jìn)行簡(jiǎn)單的消毒，這樣的操作無(wú)法將種子表面的微生物消滅干凈，更不能殺滅云杉種子內(nèi)生菌，而且殘留的有害微生物可能還會(huì)影響種子的萌發(fā)。此外，還未發(fā)現(xiàn)特定的滅菌劑能夠在不影響云杉種子萌發(fā)和幼苗后續(xù)定植的情況下殺滅其種子內(nèi)外部的微生物。
因此，亟需一種能將云杉種子微生物完全殺滅干凈的技術(shù)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種云杉種子的完全滅菌和萌發(fā)的方法。
為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種云杉種子完全滅菌的方法，使用1％～10％，w/v，AgNO3溶液浸泡種子5～30min。
優(yōu)選的，AgNO3溶液的濃度為3％。
優(yōu)選的，AgNO3溶液的濃度為3％，w/v，浸泡時(shí)間為15min。
優(yōu)選的，使用特定培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌操作，所述培養(yǎng)皿至少包括兩層，其中一層為可盛放待滅菌種子的處理層，各層間可控進(jìn)行液體流通。
優(yōu)選的，所述培養(yǎng)皿包括兩層，另一層為可盛放液體的廢液層，廢液層位于處理層下方，處理層與廢液層間設(shè)置第一液體流通結(jié)構(gòu)，所述第一液體流通結(jié)構(gòu)包括設(shè)置于處理層下方的連通排廢板，所述處理層上貫穿設(shè)置至少一個(gè)上層第一排廢孔，所述連通排廢板上對(duì)應(yīng)設(shè)置至少一個(gè)下層第二排廢孔，連通排廢板可相對(duì)于處理層旋轉(zhuǎn)，使上層第一排廢孔旋轉(zhuǎn)至與下層第二排廢孔對(duì)齊，實(shí)現(xiàn)廢液從處理層流入廢液層中。
相應(yīng)的，一種云杉種子的萌芽方法，將按照所述方法滅菌后的云杉種子在15℃，12h光照、12h黑暗交替環(huán)境中進(jìn)行萌芽。
優(yōu)選的，將云杉種子置于PDA培養(yǎng)基或LB培養(yǎng)基上進(jìn)行萌芽。
優(yōu)選的，云杉種子在滅菌前，先用水浸泡15～25h。
本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明首次提供了一種可用于云杉種子完全滅菌方法，此處“完全”的含義，指同時(shí)殺滅云杉種子的表面微生物和內(nèi)生菌。使用本發(fā)明的方法，滅菌效果高達(dá)100％；并基于該方法提供了一種種子萌芽方法，最高發(fā)芽率也高達(dá)90％以上。為了更便捷、準(zhǔn)確地進(jìn)行上述滅菌操作，本發(fā)明還提供了一種培養(yǎng)皿，可同時(shí)進(jìn)行多梯度、多重復(fù)滅菌試驗(yàn)。事實(shí)上，本發(fā)明提供的培養(yǎng)皿也可用于其他需要多梯度、多重復(fù)的試驗(yàn)上。
附圖說(shuō)明
圖1為本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖；
圖2為圖1的A-A視圖(左視剖面圖)；
圖3為本發(fā)明提供的培養(yǎng)皿蓋上培養(yǎng)皿蓋后的外殼俯視圖；
圖4為本發(fā)明連通排廢板俯視圖；
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