[發(fā)明專利]一種用于梅毒螺旋體全血抗體檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110037629.3
• 申請日: 2021-01-12
• 公開（公告）號: CN112881683A
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 石崧
• 申請（專利權(quán)）人: 瑞吉瑞得醫(yī)藥生物科技（無錫）有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 河北億順捷知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 13152
• 代理人: 王曉豐

本發(fā)明公開了一種用于梅毒螺旋體全血抗體檢測方法，涉及全血樣本預(yù)處理技術(shù)領(lǐng)域，使用方法如下：指尖血取樣針刺破指尖；用聚乙烯滴管吸取0.5毫升洗滌液洗脫約100ul指尖血(兩滴)，滴入血液樣本收集管中；取另一支聚乙烯滴管吸取0.2毫升緩沖液滴入血液樣本收集管，吹打三次以勻漿；取另一支聚乙烯滴管吸取0.2毫升緩沖液滴入血液樣本收集管，吹打三次以勻漿，將血液樣本收集管在室溫10?35攝氏度的環(huán)境靜置10分鐘；用第三支聚乙烯滴管從血液樣本收集管中吸取已預(yù)處理的樣品0.5毫升。本方法通過使用新設(shè)計的緩沖液和膠體金試紙，使對梅毒RPR抗體的檢測敏感度得到提升，從而實(shí)現(xiàn)對梅毒患者更早的治療和干預(yù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及全血樣本預(yù)處理技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種用于梅毒螺旋體全血抗體檢測方法。

背景技術(shù)

膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，形成帶負(fù)電的疏水膠溶液，由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱膠體金。膠體金在弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷，可與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合，由于這種結(jié)合是靜電結(jié)合，所以不影響蛋白質(zhì)的生物特性。

膠體金除了與蛋白質(zhì)結(jié)合以外，還可以與許多其它生物大分子結(jié)合，如SPA、PHA、ConA等。根據(jù)膠體金的一些物理性狀，如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應(yīng)，加上結(jié)合物的免疫和生物學(xué)特性，因而使膠體金廣泛地應(yīng)用于免疫學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域。

當(dāng)檢測全血樣本中的梅毒螺旋體抗體RPR時，往往需要在高危暴露四周后進(jìn)行，此時血液中梅毒抗體RPR含量較高，不能更早檢測到梅毒抗體。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明專利的目的在于提供一種用于梅毒螺旋體全血抗體檢測方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種用于梅毒螺旋體全血抗體檢測方法，步驟如下：

S1、指尖血取樣針刺破指尖；

S2、用聚乙烯滴管吸取0.5毫升洗滌液洗脫約100ul指尖血(兩滴)，滴入血液樣本收集管中；

S3、取另一支聚乙烯滴管吸取0.2毫升緩沖液滴入血液樣本收集管，吹打三次以勻漿；

S4、取另一支聚乙烯滴管吸取0.2毫升緩沖液滴入血液樣本收集管，吹打三次以勻漿；

S5、將血液樣本收集管在室溫10-35攝氏度的環(huán)境靜置10分鐘；

S6、用第三支聚乙烯滴管從血液樣本收集管中吸取已預(yù)處理的樣品0.5毫升，滴到膠體金試紙條的樣品墊上，靜置15-20分鐘讀取結(jié)果。

優(yōu)選的，所述洗滌液包括：醋酸鈉，所述醋酸鈉的摩爾濃度為10mM，所述結(jié)合緩沖液的pH值為9.0。

優(yōu)選的，所述緩沖液包括：Tris鹽酸鹽、肝素鈉、NP40中性表面活性劑、Benzonase核酸酶，所述緩沖液的pH值為8.0；

所述Tris鹽酸鹽的摩爾濃度為290～310mM，所述肝素鈉的添加量為9～11IU，所述NP40中性表面活性劑質(zhì)量百分含量為0.084～0.12％，所述Benzonase核酸酶的添加量為0.8～1.2IU。

優(yōu)選的，所述Tris鹽酸鹽的摩爾濃度為300mM，所述肝素鈉的添加量為10IU，所述NP40中性表面活性劑質(zhì)量百分含量為0.1％，所述Benzonase核酸酶的添加量為1IU。

優(yōu)選的，所述膠體金試紙條為有含有心卵磷脂的膠體金試紙條。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

本方法通過使用新設(shè)計的緩沖液和膠體金試紙，使對梅毒RPR抗體的檢測敏感度得到提升，從而實(shí)現(xiàn)對梅毒患者更早的治療和干預(yù)。

具體實(shí)施方式