[發明專利]一種活性氧觸發電荷湮滅型超電荷陽離子聚合物轉染試劑及其制備和應用

在審

• 申請號: 202110033430.3
• 申請日: 2021-01-11
• 公開（公告）號: CN112851935A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 丁楊;周建平;程皓;張華清;盛鈺
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C08G73/02
• 分類號: C08G73/02;C08G69/48;C08B37/08;C08G83/00;A61K9/51;A61K47/34;A61K47/36;A61K31/7105;C12N15/87
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

1.一種超電荷陽離子聚合物，其特征在于所述的超電荷陽離子聚合物為脂肪胺聚合物，包括活性氧響應基團和季銨鹽結構；所述活性氧響應基團為能在活性氧作用下氧化水解的基團，選自芳香硼酸、芳香硼酸酯、草酸單芳香酯、草酸二芳香酯中的一種或幾種；所述季銨鹽結構具有超高密度正電荷。

2.根據權利要求1所述的超電荷陽離子聚合物，其特征在于，所述的超電荷陽離子聚合物選自以下任意一種結構的物質，其中R₁、R₂、R₃獨立的選自羥基、碳原子數不超過20的烷基或芳香烴基,或者R₁、R₂通過化學鍵連接成環，n或x+y之和為50～1000間的整數，PAMAM的代數為2.0-7.0：

3.權利要求1或2所述的超電荷陽離子聚合物在制備生物大分子藥物裝載和遞送系統中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于所述的生物大分子藥物選自核酸、多肽、蛋白類生物大分子及其衍生物。

5.一種轉染試劑，其特征在于，包括權利要求1～2中任一項超電荷陽離子聚合物和轉染試劑工作液，所述的轉染試劑工作液選自PBS溶液、生理鹽水、5％葡萄糖溶液、細胞培養基中的一種或幾種。

6.權利要求5所述的活性氧觸發電荷湮滅型超電荷陽離子聚合物轉染試劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)通過還原胺化反應將脂肪胺聚合物中的胺基轉化為叔胺，經分離純化，得叔胺化的脂肪胺聚合物；

(2)在催化劑作用下，鹵代活性氧響應基團與叔胺化的脂肪胺聚合物在反應介質中避光反應，經分離純化，冷凍干燥得所述超電荷陽離子聚合物；

(3)將超電荷陽離子聚合物溶解于轉染試劑工作液中，經過濾除菌，得所述轉染試劑。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于：

步驟(1)中所述的脂肪胺聚合物選自聚乙烯亞胺、多烯多胺、聚賴氨酸、殼聚糖、氨基乙基乙醇胺樹枝狀聚合物中的一種；還原胺化反應所用試劑包括有機醛和有機羧酸，所述脂肪胺聚合物中胺基與有機醛中醛基的反應摩爾比為1：(1.5～10)，所述脂肪胺聚合物中胺基與有機羧酸中羧基的反應摩爾比為1：(2.2～10)；

步驟(2)中催化劑為碘化鉀、無水碳酸鉀、無水碳酸鈉中的一種或幾種；反應介質為N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、甲醇、乙醇、乙腈中的一種或幾種。

8.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中的還原胺化反應的反應溫度為60～100℃，反應時間為6～24h；分離純化方法為在反應液中加入酸液，反應液蒸發至干，所得固體溶解于水中，加入堿液，分離有機相，干燥得叔胺化脂肪胺聚合物。

9.權利要求5所述的轉染試劑在于生物大分子藥物轉染中的應用，所述生物大分子藥物選自核酸、多肽和蛋白類生物大分子及其衍生物。

10.根據權利要求9所述的轉染試劑的應用，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將生物大分子藥物溶解于生理溶液中，加入轉染試劑，混勻，得超電荷陽離子聚合物/生物大分子藥物復合物溶液；

(2)所述的超電荷陽離子聚合物/生物大分子藥物復合物溶液可用于體外細胞轉染，或用于靜脈注射、靜脈滴注、皮下注射、肌肉注射、病灶局部注射、鼻腔給藥、眼部給藥、肺部給藥中的一種或多種。