[發明專利]新型FRET供受體對及其應用

在審

• 申請號: 202110032455.1
• 申請日: 2021-01-11
• 公開（公告）號: CN112778235A
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: 李濤;汪啟偉;史麗麗
• 申請（專利權）人: 中國科學技術大學
• 主分類號: C07D277/64
• 分類號: C07D277/64;C07D277/66;C09K11/06;G01N21/64;A61K49/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王歡

本發明涉及生物分析技術領域，特別涉及新型FRET供受體對及其應用。本發明提供的FRET供受體對呈現出比傳統體系(如Cy3/Cy5)更好的FRET效率、光穩定性、耐酸性，并將其作為信號讀出體系，適用于酸性條件下靠近誘導的DNA適配體傳感分析。

技術領域

本發明涉及生物分析技術領域，尤其涉及新型FRET供受體對及其應用。

背景技術

熒光共振能量轉移(FRET)是一種比較成熟的生物分析及細胞成像技術，在DNA分析領域應用最為廣泛的FRET體系是花菁染料Cy3/Cy5對。然而，研究表明Cy5熒光受Mg²⁺影響比較大，但Mg²⁺在DNA分析中經常被用來穩定DNA納米腳手架；另一方面，Cy5熒光受酸性pH影響，在酸性環境中工作信號較弱。因此，發展受外界條件影響較小的新型高效FRET體系，在DNA傳感分析及細胞生物成像方面具有良好應用前景。

一些噻唑類熒光分子轉體如硫磺素(ThT)具有自身熒光低、與某些DNA二級結構特異作用等性質，在DNA傳感分析與細胞生物成像方面引起極大關注。由于分子內電子轉移作用，這些分子熒光往往表現出較大Stokes位移，在FRET體系中能夠有效減小供體熒光對FRET信號的干擾。然而，在前期報道中，很少將其成對用作FRET體系，并普遍用于DNA分析與細胞成像中，主要原因在于：一、能夠標記DNA的該類功能化熒光探針較難合成；二，該類探針熒光較弱，只適用于某些特殊DNA結構中，普適性較低。由此可見，開發一種新型高效FRET體系，具有及其重要的現實意義。目前國內外在此方面沒有相關解決方法和技術報道。

發明內容

本發明的目的在于提供新型FRET供受體對及其應用，本發明FRET供受體對體系具有更好的FRET效率、光穩定性和耐酸性。

本發明提供的FRET供受體對，包括供體化合物和受體化合物；

所述受體化合物具有式I所示結構，供體化合物具有式II所示結構，

其中，R1、R1’獨立的選自氫、C1～C6的烷基，R2、R2’獨立的選自選自氫、苯基、烷基取代的苯基、鹵素取代的苯基，R3、R3’獨立的選自C1～C6的烷基、烷基取代的磺酸基。

一些實施方案中，R1、R1’獨立的選自氫、甲基。

一些實施方案中，R2，R2’獨立的選自氫、苯基；R2，R2’為苯基時，R2，R2’分別與其連接的苯環形成稠環結構。

一些實施方案中，R3，R3’獨立的選自甲基、乙基、丙磺酸基。

一些優選實施例中，R1，R1’為氫；R2、R2’為苯基，R2、R2’分別與其連接的苯環形成稠環結構；R3、R3’分別為丙磺酸基團與甲基，具體地，受體化合物結構如式I-1所示，將其命名為WL2.5；供體化合物的如式II-2所示，將其命名為CNT:

一些優選實施方案中，R1，R1’獨立的選自氫、甲基，R2、R2’為氫或苯基；R2、R2’為苯基時，R2、R2’分別與其連接的苯環形成稠環結構；R3、R3’選自丙磺酸基、甲基、乙基。，具體地，受體化合物結構如式I-2～6所示，供體化合物的如式II-2～6所示: