[發明專利]吡咯異喹啉聚集誘導的熒光分子探針及制備和應用

有效

• 申請號: 202110030361.0
• 申請日: 2021-01-11
• 公開（公告）號: CN112724085B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 鄒宏斌;李進彪;張帥眾;勞嘉欣
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D221/16
• 分類號: C07D221/16;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

1.一種吡咯異喹啉聚集誘導的熒光分子，其特征在于，所述的吡咯異喹啉類衍生物的結構如下：

。

2.權利要求1所述吡咯異喹啉聚集誘導的熒光分子的制備方法，其特征在于，通過以下步驟實現：

a）在無水四氫呋喃中，4-氯苯甲酰氯在甲基溴化鎂催化下與1H-吡咯反應生成M1；

b）在N，N-二甲基甲酰胺中，中間體M1在氫化鈉的催化下與溴乙腈反應生成中間體M2；

c）在N，N-二甲基甲酰胺中，中間體M2在叔丁醇鉀的催化下，用醋酸、間氯過氧苯甲酸、碘甲烷處理反應體系分別得化合物I-1、I-2、I-3；

d）在2，4-二氧六環中，化合物I-2、I-3在四（三苯基膦）鈀和叔丁醇鋰的催化下與（4-（二苯氨基）苯基）硼酸反應分別得化合物I-4、I-5；

合成路線如下：

。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟a）中，在氮氣保護的條件下，將1H-吡咯溶于無水四氫呋喃并在50℃下逐滴滴加到甲基溴化鎂正己烷溶液中，滴加完成后，溶液再回流30分鐘，然后將反應液冷卻至室溫后，逐滴加入溶解于無水四氫呋喃中的4-氯苯甲酰氯，室溫下反應過夜，薄層色譜監測原料反應完全后，反應液倒入飽和氯化銨水溶液中并用乙酸乙酯和萃取，水相用乙酸乙酯萃取兩次，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾除去溶劑，所得粗產物經硅膠柱層析純化得到白色中間體M1。

4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟b）中，在氮氣保護的條件下，將中間體M1溶于無水N，N-二甲基甲酰胺中，在0℃下加入NaH，將反應液在0℃下攪拌反應30分鐘后，逐滴加入溶于無水N，N-二甲基甲酰胺中的溴乙腈，將反應液緩慢升至室溫并再攪拌2小時，將反應液逐滴加入冰水中，過濾，殘渣用乙醇中重結晶得中間體M2。

5.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟c）中，在氮氣保護的條件下，將中間體M2溶于無水N，N-二甲基甲酰胺中，在-5℃下加入叔丁醇鉀，在-5℃下攪拌混合物5分鐘后，向反應液中分別加入醋酸、間氯過氧苯甲酸、碘甲烷使反應猝滅并在室溫下再攪拌反應10分鐘，薄層色譜監測原料反應完全后，反應液倒入水中并用乙酸乙酯和萃取，水相用乙酸乙酯萃取兩次，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾除去溶劑，所得粗產物經硅膠柱層析純化分別得白色固體I-1、綠色固體I-2、淡黃色固體I-3。

6.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟d）中，將化合物I-2或化合物I-3、（4-（二苯胺基）苯基）硼酸、四（三苯基膦）鈀和叔丁醇鋰溶液在2，4-二氧六環中攪拌回流反應36小時，薄層色譜監測原料反應完全后，反應液倒入水中并用乙酸乙酯和萃取，水相用乙酸乙酯萃取兩次，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾除去溶劑，所得粗產物經硅膠柱層析純化分別得紅色固體I-4或綠色固體I-5。

7.權利要求1所述的吡咯異喹啉聚集誘導的熒光分子在制備用于細胞脂質滴熒光標記和成像的熒光探針中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，將所述的熒光分子探針直接或溶解在溶液中，再加入含有細胞的培養基中，所述熒光探針被細胞攝取并在脂質滴處聚集，在紫外光激發下發出熒光，從而完成對細胞中脂質滴的標記和成像。

9.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述熒光探針的工作濃度為0.1μmol/L至1mol/L。

10.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，紫外光波長為200nm至500nm。