[發明專利]一種重組畢赤酵母基因工程菌及其構建方法與在產木聚糖酶中的應用有效
| 申請號： | 202110029601.5 | 申請日： | 2021-01-11 |
| 公開（公告）號： | CN112592844B | 公開（公告）日： | 2023-08-18 |
| 發明（設計）人： | 應漢杰;牛歡青;宋佳睿;閔志迪;陳勇;劉慶國;柳東 | 申請（專利權）人： | 南京工業大學 |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12N15/81;C12N9/24;C12R1/84 |
| 代理公司： | 江蘇圣典律師事務所 32237 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 211816 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 重組 酵母 基因工程 及其 構建 方法 聚糖 中的 應用 | ||
1.一種重組畢赤酵母基因工程菌在產木聚糖酶中的應用，其特征在于，所述重組畢赤酵母基因工程菌為在所述畢赤酵母菌中過表達凝集素蛋白基因LMAN2；所述畢赤酵母為Pichia?Pastoris?GS115；所述凝集素蛋白基因LMAN2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述重組畢赤酵母基因工程菌的構建方法包括以下步驟：
(1)以畢赤酵母基因組為模板，PCR擴增LMAN2基因片段；
(2)將步驟(1)獲得的LMAN2基因片段克隆到表達質粒上，得到重組質粒；
(3)將步驟(2)獲得的重組質粒線性化后導入畢赤酵母菌中，篩選得到重組畢赤酵母基因工程菌。
3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述重組畢赤酵母基因工程菌通過游離發酵的方式產木聚糖酶。
4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述重組畢赤酵母基因工程菌通過固定發酵的方式產木聚糖酶。
5.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述重組畢赤酵母基因工程菌通過固定化連續發酵的方式產木聚糖酶。
6.根據權利要求4或5所述的應用，其特征在于，固定化載體的用量為2-80g/L發酵培養基。
7.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述產木聚糖酶的發酵培養基中，各組分的濃度為：蛋白胨10-30g/L、酵母粉5-15g/L、無氨基酵母氮源10-20g/L、磷酸氫二鉀0.1-1g/L、磷酸二氫鉀1-5g/L、生物素0.1-5mg/L。
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