[發明專利]一種可視化快速、靈敏檢測炭疽桿菌的試劑及其檢測方法

有效

• 申請號: 202110027645.4
• 申請日: 2021-01-11
• 公開（公告）號: CN112759532B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 何煒;盧先林;蘭婷;田秦秦;李明華;張邦樂
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍空軍軍醫大學
• 主分類號: C07C251/24
• 分類號: C07C251/24;C07C249/02;G01N21/78;G01N21/64
• 代理公司: 西安西達專利代理有限責任公司 61202
• 代理人: 謝鋼

本發明涉及一種實現炭疽桿菌生物標志物二吡啶甲酸可視化檢測的Eu³⁺?小分子配合物傳感器及其制備方法。將鄰苯二酚類化合物與Eu³⁺進行螯合，得到具有比色和熒光雙響應的配合物，通過二次吡啶甲酸與配合物反應發生的光物理學性質改變，實現對二吡啶甲酸的快速可視化檢測。本發明配合物具有合成簡單、檢測快速的特點，對目標檢測物有很高的靈敏度及選擇性，進而實現裸眼監測二吡啶甲酸動態水平變化，并可負載于試紙上，成為快速可視化檢測炭疽桿菌的優異工具，具有廣泛的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種可視化快速、靈敏檢測炭疽桿菌的試劑及其檢測方法，屬于發光技術領域。

背景技術

炭疽芽孢桿菌是革蘭氏陽性芽孢菌，屬于需氧型菌類。炭疽是食草動物的一種主要疾病，可通過土壤中、皮毛上的芽孢導致感染。炭疽芽孢可以通過人類的呼吸道、消化道和皮膚間接感染人類，以皮膚型炭疽最為常見。由于炭疽芽孢在環境中的抵抗力極強，由此在軍事方面，一直被各個國家列為是頭號生物戰劑，而吡啶-2,?6-二甲酸(DPA)作為炭疽芽孢桿菌殼層的主要組成成分，大約占據了干炭疽桿菌芽孢質量5-15%，因此可以通過可視化且定量檢測DPA的含量來間接檢測炭疽芽孢桿菌動態水平。

目前，檢測炭疽桿菌芽孢的方法主要有生物方法和化學方法。其中，生物分析方法主要涵蓋聚合酶鏈式反應和疫分析法，而化學方法分為高效液相色譜法、毛細管電泳法、電化學法、表面增強拉曼光譜法等。雖然這些都有著各自的優點，但這些方法依然存在著分析時間長，且操作復雜和成本高等不足，不能達到快速檢測的目的。近年來，三價鑭系離子獨特的發光特性，如大的斯托克斯位移、窄發射帶和優異的熒光壽命等，被廣泛應用于光敏材料的制備。目前，有關熒光法檢測吡啶-2,?6-二甲酸的研究逐漸增多，然而這些往往需要各精細的納米粒子或者其他納米手段，往往涉及到繁瑣的合成和純化步驟，導致反應周期長，合成成本高。因此，尋找合成簡單、綠色高效、成本低廉、可以大規模推廣的新型檢測方法仍然是研究的重點領域。

發明內容

本發明的目的是針對當前檢測吡啶-2,?6-二甲酸技術中存在的不足，提供一種高效可視化、特異性選擇性地檢測炭疽桿菌標志物吡啶-2,?6-二甲酸的試劑及其檢測方法。

本發明實現過程如下：

一種可視化快速、靈敏檢測炭疽桿菌的試劑，所述試劑為結構式（I）所示的化合物與三價銪離子形成的配合物，

所述R選自氫、羥基、氨基、硝基、鹵素、C1-C4的烷基、C1-C4的烷氧基，優選為氫和羥基。

所述配合物的制備方法為：將可溶性三價銪鹽與結構式（I）所示的化合物共同溶于水后干燥即可。所述三價銪鹽與結構式（I）所示的化合物的摩爾比為：1:100~100:1，優選為1:10~10:1。

在載體上負載結構式（I）所示的化合物與三價銪離子形成的配合物得到檢測炭疽桿菌的傳感器，所述傳感器是將配合物負載于載體之上，所述載體包括紙張、玻璃片、塑料片、金屬片等，所述傳感器能夠檢測吡啶-2,?6-二甲酸的濃度范圍為0.1?μM～100?μM。

結構式（I）所示的化合物與三價銪離子形成的配合物在檢測炭疽桿菌中的應用。