[發明專利]一種同時檢測小金膠囊原型代謝物中兩種揮發性成分含量的方法

有效

• 申請號: 202110026523.3
• 申請日: 2021-01-08
• 公開（公告）號: CN112684073B
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發明（設計）人: 趙剛;任霞;吳雪英;余麗花;郭平;張夢婷;黃佩聞
• 申請（專利權）人: 健民藥業集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 武漢藍寶石專利代理事務所(特殊普通合伙) 42242
• 代理人: 劉璐

本發明涉及分析檢測技術領域，具體涉及一種同時檢測小金膠囊原型代謝物中兩種揮發性成分含量的方法。本發明的目的在于提供一種同時提取小金膠囊原型代謝物中兩種揮發性成分的方法，收集服用小金膠囊后的動物血液，離心分離得到血清，采用正己烷對上述血清中的兩種揮發性成分麝香酮和肉桂酸龍腦酯進行提取。本發明的目的還在于提供一種同時檢測小金膠囊原型代謝物中兩種揮發性成分含量的方法，其包括采用上述提取方式進行提取和對提取后的樣本采用氣相色譜?質譜聯用分析儀檢測分析兩個步驟。

技術領域

本發明涉及分析檢測技術領域，具體涉及一種同時檢測小金膠囊原型代謝物中兩種揮發性成分含量的方法。

背景技術

小金膠囊是《中國藥典》2015版一部收載的一種具有散結消腫，化瘀止痛之功效的中藥，它由人工麝香、木鱉子、草烏、楓香脂、乳香、沒藥、五靈脂、當歸、地龍、香墨等10味藥材制備而成。為了闡明其治療機理，申請人對該中藥進行了大量物質基礎和作用機理研究。其中，對中藥經口服后，進入動物體內的化學成分及其代謝產物進行了系統研究，發現麝香酮和肉桂酸龍腦酯是小金膠囊代謝后進入到血液中的兩個關鍵的原型代謝物，為了更好的研究小金膠囊的代謝情況，闡明其治療機理，為后續用藥等提供依據，如何進行麝香酮和肉桂酸龍腦酯的定量檢測就顯得尤為重要。

發明內容

基于此，本發明的目的之一在于提供一種同時提取小金膠囊原型代謝物中兩種揮發性成分的方法，包括以下步驟：收集服用小金膠囊后的動物血液，離心分離得到血清，采用正己烷對上述血清中的兩種揮發性成分麝香酮和肉桂酸龍腦酯進行提取。

優選的，提取步驟如下：在血清中加入正己烷，渦旋混合后離心，分離得到上清液，干燥，然后采用甲醇復溶，即得。

本發明的目的之二在于提供一種同時檢測小金膠囊原型代謝物中兩種揮發性成分含量的方法，采用上述的提取方式進行提取，對復溶后的液體采用氣相色譜-質譜聯用分析儀檢測分析。

優選地，檢測分析時采用離子檢測模式監測和不分流進樣。

優選地，檢測分析時的離子組為：麝香酮，85、97、125、209、238；肉桂酸龍腦酯，77、109、131、153、284。

優選地，檢測分析時的升溫程序為：初始溫度200～240℃，維持1～3min，然后以25～35℃/min的速率升溫至260～300℃，維持0.5～1.5min，溶劑延遲1～3min。

更優選地，檢測分析時的升溫程序為：初始溫度220℃，維持2min，然后以30℃/min的速率升溫至280℃，維持1min，溶劑延遲2min。

優選地，檢測分析時的色譜柱為：HP-5MS色譜柱。

優選地，檢測分析的條件如下：色譜柱：30m×0.25mm×0.50μm的HP-5MS色譜柱；載氣：高純氮氣，恒流模式，流速為0.7mL/min；程序升溫：220℃維持2min，然后以30℃/min的速率升溫至280℃，維持1min，溶劑延遲,4min；不分流進樣，進樣口溫度為250℃；傳輸線溫度：270℃，電離方式：電噴霧電離源(ESI)，電離能量：70eV；離子源溫度：250℃；四級桿溫度：150℃。

優選地，檢測分析時的升溫程序為：初始溫度70～90℃，然后以15～25℃/min的速率升溫至260～300℃。

本發明采用正己烷對服用了小金膠囊后的動物血清進行提取，然后采用氣相色譜-質譜聯用分析儀檢測分析，能夠同時對揮發性成分麝香酮和肉桂酸龍腦酯進行提取和檢測，麝香酮的回收率可以達到96％～104％，檢出限能達到0.06μg/mL，肉桂酸龍腦酯的回收率可以達到98％～104％，檢出限能達到0.03μg/mL，操作簡便、快速、準確、靈敏度高重復性好。

附圖說明