[發明專利]一種利用日本曲霉PJ01產酶降解西番蓮果皮多糖的制備方法及應用

在審

• 申請號: 202110025376.8
• 申請日: 2021-01-08
• 公開（公告）號: CN112877381A
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 李霞;孫永進;單楊;李培駿;關媛
• 申請（專利權）人: 桂林理工大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C08B37/00;C12R1/66
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用日本曲霉PJ01產酶降解西番蓮果皮多糖的制備方法，其特征在于具體步驟為：

(1)取新鮮西番蓮果皮洗凈，50℃烘干，粉碎，在85℃條件下，按照料液比1:20g/mL加入80％的乙醇冷凝回流提取3次，每次2h，過濾，殘渣干燥，即得去除色素、酚類的西番蓮果皮粉末；

(2)稱取1g步驟(1)制得的西番蓮果皮粉末，按照料液比1:27g/mL的比例加入蒸餾水，微波提取3min，過濾，3000rpm離心10min，取上清液濃縮，即得到濃縮液；

(3)取步驟(2)制得的濃縮液加入4倍體積的無水乙醇，混勻，靜置48h，4000rpm離心15min，取沉淀冷凍干燥，獲得水提西番蓮果皮多糖；

(4)以日本曲霉PJ01為實驗菌株，接種于PDA斜面上培養；挑取長勢較好的單菌落純化，活化2次，接種斜面保存，即得活化后的菌種；

(5)將步驟(4)活化后的菌種接種于PDA固態發酵培養基，于30℃恒溫培養箱中培養3天，以1:20(w:v)的比例加蒸餾水浸泡固態發酵產酶的發酵底物，在170rpm，40℃的條件下在振蕩培養箱反應2h，獲得粗酶液；

(6)按1:200(w:v)的比例將步驟(3)獲得的水提西番蓮果皮多糖與步驟(5)獲得的粗酶液混合，于45℃水浴鍋溶解，然后轉入振蕩培養箱中，在45℃，170rpm條件下水解6h，最后沸水浴5min以終止反應，濃縮，冷凍干燥，得到酶解西番蓮果皮多糖。

2.根據權利要求1所述的制備方法制備的酶降解后西番蓮果皮多糖的應用，其特征在該酶解西番蓮果皮多糖應用于抗氧化類保健品與化妝品。