[發明專利]一種能夠產生IAA并且能促進丹參生長的變棲克雷伯氏菌及其應用

在審

• 申請號: 202110019711.3
• 申請日: 2021-01-07
• 公開（公告）號: CN112852661A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 文藝;楊瑾;王飛;秦艷紅;李雪夢;魯傳濤;高素霞;劉玉霞;戚文平
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/20;A01P21/00;C12R1/22
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 宮建華

本發明公開了一種能夠產生IAA并且能促進丹參生長的變棲克雷伯氏菌，該菌株編號為變棲克雷伯氏菌(Klebsiella variicola)13?2，已保藏于已保藏于“中國典型培養物保藏中心”(簡稱CCTCC)，保藏地址：湖北省武漢市，洪山區八一路，武漢大學山國典型培養物保藏中心，登記入冊的保藏號為CCTCC M 2020923，保藏日期為2020年12月21日。利用該促生菌制備的菌劑，具有促進丹參生長的作用，使用后不會有環境污染、農藥殘留等化學農藥常見問題，對人畜健康、生態環境友好，符合人們對生態農業的需求。本發明篩選的變棲克雷伯氏菌使用后不會有環境污染、農藥殘留等化學農藥常見問題，對人畜健康、生態環境友好，符合人們對生態農業的需求。

技術領域

本發明涉及一種能夠產生IAA并且能促進丹參生長的變棲克雷伯氏菌及其應用，屬于微生物技術領域。

背景技術

丹參Salvia miltiorrhizaBge為唇形科多年生草本，以干燥根和根莖入藥，是治療心腦血管疾病的首選藥物之一。近年來，種植丹參已經成為河南省豫西貧困山區脫貧攻堅和鄉村振興的重要舉措。為了保證丹參的產量，多數藥材種植戶在丹參的種植過程中廣泛使用化學肥料和化學藥劑，一定程度上降低了丹參的品質，嚴重情況下還會出現肥害和藥害，甚至導致化學制劑殘留超標，同時對種植區的生態環境也造成了污染。

發掘可促進丹參生長的環境友好微生物方面已經受到學者的重視，開發微生物菌肥并加以應用，既可以保證丹參的品質和產量，又維護了生態環境，使得丹參產業健康可持續發展。我國目前有關植物促生菌的報道主要包括產生長激素、解磷、解鉀和固氮特性的微生物，其中吲哚乙酸(IAA)是植物生長過程中必需的生長調節劑，各個組織尤其是根部對IAA都比較敏感，因此，IAA在植物生長過程中起著關鍵的作用。植物內生細菌對于自身寄主具有較好的適應和定殖能力，可安全穩定的在寄主上進一步的應用。本研究發現丹參產IAA的內生菌能夠顯著促進植株的生長，而關于丹參內生產IAA細菌的研究未見報道，因此篩選能夠產生IAA并促進丹參生長的菌株具有重要的理論和實踐意義。

發明內容

本發明所要解決的技術問題，是克服現有技術的不足，提供一種能夠產生IAA并促進丹參生長的促生菌，能有效促進丹參的生長，取代化學肥料和化學藥劑，實現綠色種植。

本發明未解決上述技術問題所采用的技術方案是：

一種能夠產生IAA并且能促進丹參生長的變棲克雷伯氏菌，該菌株編號為變棲克雷伯氏菌 (Klebsiella variicola)13-2，已保藏于已保藏于“中國典型培養物保藏中心”(簡稱CCTCC)，保藏地址：湖北省武漢市，洪山區八一路，武漢大學山國典型培養物保藏中心，登記入冊的保藏號為CCTCC M 2020923，保藏日期為2020年12月21日。

所述的一種能夠產生IAA并且能促進丹參生長的變棲克雷伯氏菌，其篩選方法為：取新鮮無病害的丹參植株根部，先用流水沖洗30min，然后用無菌水沖洗5次后，對材料表面進行消毒，先用75％乙醇浸泡45s，然后用0.1％升汞中浸泡3min,無菌水沖洗3～4次。無菌條件下，用滅菌剪刀將根段剪成3mm×3mm小塊，接種到LB培養基上，28℃避光培養1～2d，至菌落長出后分離純化，然后篩選出可以產生吲哚乙酸的菌株，并鑒定，得到變棲克雷伯氏菌13-2。

所述的一種能夠產生IAA并且能促進丹參生長的變棲克雷伯氏菌，其在促進丹參生長方面的應用。

所述的一種能夠產生IAA并且能促進丹參生長的變棲克雷伯氏菌，其在制備促進丹參生長的菌劑中的應用。

所述的菌劑的制備方法為：將變棲克雷伯氏菌(Klebsiella variicola)13-2接種于LB培養基中，在28℃、180rpm條件下振蕩培養12h制備種子菌，種子菌以2％的接種量接種于LB培養基中，在28℃、180rpm條件下發酵48h，形成發酵液，即為菌劑。