[發明專利]揮發油復配增溶劑及揮發油酪氨酸酶活性抑制的測定方法

在審

• 申請號: 202110016930.6
• 申請日: 2021-01-07
• 公開（公告）號: CN112730017A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 朱麗云;高永生;金斐;趙前
• 申請（專利權）人: 中國計量大學
• 主分類號: G01N1/38
• 分類號: G01N1/38;G01N21/31
• 代理公司: 臺州杭欣專利代理事務所(普通合伙) 33333
• 代理人: 尚竹亞

本發明公開了揮發油復配增溶劑及揮發油酪氨酸酶活性抑制的測定方法；復配增溶劑應用于揮發油對酪氨酸酶活性抑制測定中的將非水溶性揮發油助溶于水溶性體系中；復配增溶劑包括二甲基亞砜、氫化蓖麻油、吐溫20、乙醇；復配增溶劑與揮發油按照一定比例添加，按照揮發油使用量的質量百分數二甲基亞砜不超過20％；氫化蓖麻油不超過1％；吐溫20不超過1％；乙醇不超過10％。本發明的復配增溶劑對酪氨酸酶的抑制作用低，同時滿足既能溶解揮發油使體系澄清透明且對酪氨酸酶的活性影響控制在10％以下的要求。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別是涉及一種揮發油復配增溶劑及揮發油酪氨酸酶活性抑制的 測定方法。

背景技術

酪氨酸酶抑制劑可以作為食品中的保鮮劑，或者農業中的抗蟲劑，或者在醫學和化妝品 中可作為皮膚脫色劑和增白美容化妝品等。

常見的酪氨酸酶抑制劑包括從動物中提取的多肽類化合物，植物中提取的黃酮類、糖苷 類、多酚類化合物以及微生物的代謝產物和化學合成物等。在這些抑制劑中，大部分為水溶 性成分。而近幾年的研究報道中，存在著一類非水溶性物質——芳香植物揮發油(例如薰衣 草精油、檸檬精油或檸檬醛等)，其對酪氨酸酶活性抑制作用顯著，是一類具有潛在應用價值 的活性化合物。

在現有技術中對于溶于揮發油中酪氨酸酶活性的測定，通常是將酪氨酸酶溶于揮發油中， 再使用單一的增溶劑將溶液溶于水溶性體系中進行測定，但是對于增溶劑本身對酪氨酸酶活 性的影響沒有考慮，或是不能避免增溶劑對酪氨酸酶活性的影響。

例如在張青等在甜橙精油抑制酪氨酸酶的實驗中，采用10％乙醇磷酸鹽緩沖溶液配制甜 橙精油，實驗中沒有考慮乙醇本身對酪氨酸酶活性的抑制作用；南京師范大學姜洪芳等采用 二甲基亞砜作為薰衣草精油的溶劑溶解稀釋薰衣草精油并進行酪氨酸酶抑制活性測定，實驗 中沒有考慮二甲基亞砜本身對酪氨酸酶活性的抑制作用；再如中國熱帶農業科學院廖良坤等 采用甲醇配置并稀釋斜葉黃檀精油，并對酪氨酸酶活性進行抑制測定，甲醇容易引起蛋白質 變性，而酪氨酸酶是一種含銅蛋白，因此將一定程度上引起酪氨酸酶的失活；另外還有胡君 姣等將檸檬精油或檸檬醛等揮發性成分以一定比例加入0.5M pH6.86的PBS緩沖溶液中，然后 加入水溶性的體系進行酪氨酸酶活性抑制實驗，但是由于檸檬精油或檸檬醛的非水溶特點， 在此體系下并不能真實反映檸檬精油或檸檬醛等對酪氨酸酶活性的抑制作用；上述對揮發油 中酪氨酸酶活性的測定中增溶劑對酪氨酸酶活性的影響都不低，這將影響芳香植物揮發油溶 液作為酪氨酸酶抑制劑的研究進展。

發明內容

本發明的目的是提供一種揮發油復配增溶劑，可以解決上述技術問題中的一個或是多個。

為了達到上述目的，本發明提出的技術方案如下：

揮發油復配增溶劑，所述復配增溶劑應用于揮發油對酪氨酸酶活性抑制測定中的將揮發 油助溶于水溶性體系中；

所述復配增溶劑包括二甲基亞砜、氫化蓖麻油、吐溫20、乙醇；

所述復配增溶劑在揮發油溶于水溶性體系時，所述復配增溶劑與所述揮發油按照一定比 例添加，按照揮發油使用量的質量百分數所述二甲基亞砜不超過20％；所述氫化蓖麻油不超 過1％；所述吐溫20不超過1％；所述乙醇不超過10％。

進一步的：二甲基亞砜20％、乙醇10％、吐溫201％、氫化蓖麻油1％。

進一步的：二甲基亞砜10％、乙醇5％、吐溫201％、氫化蓖麻油0.5％。

進一步的：二甲基亞砜10％、乙醇5％、吐溫201％、氫化蓖麻油1％。

進一步的：二甲基亞砜10％、乙醇10％、吐溫200.5％、氫化蓖麻油1％。

進一步的：二甲基亞砜20％、乙醇5％、吐溫200.5％、氫化蓖麻油1％。