[發明專利]PARP抑制劑聯合CAR-T細胞在制備抗腫瘤藥物中的應用

在審

• 申請號: 202110011813.0
• 申請日: 2021-01-06
• 公開（公告）號: CN112773890A
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: 紀鋒;郭志剛;胡志剛;張凡;張苗苗;陳健楠;張子喻;龍凱麗
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K31/502;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 楊曉莉

本發明公開了PARP抑制劑聯合CAR?T細胞在制備抗腫瘤藥物中的應用。本發明研究發現PARP抑制劑可以促進腫瘤微環境中CD8⁺CAR?T細胞的浸潤，使低劑量CAR?T治療同樣能夠達到腫瘤完全消退的效果，有望為CAR?T細胞免疫治療中細胞因子風暴的控制提供新的方案。

技術領域

本發明屬于生物醫藥和細胞生物學技術，具體涉及PARP抑制劑聯合CAR-T細胞在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

CAR-T細胞是由單克隆抗體的單鏈可變區和T細胞信號轉導區連接而成，抗體與相應的腫瘤抗原結合后能以主要組織相容性復合體以非限制性方式使T細胞活化，進而發揮抗腫瘤效應。

目前，第二代CAR-T仍處于研究的主流地位，對于血液瘤而言具有較好的療效，2017年就有兩款CAR-T療法獲批上市，用于治療急性淋巴細胞白血病的Kymriah和治療非霍奇金淋巴瘤的Yescarta。基于血液瘤治療的成功，第三、四代CAR-T應運而生，擴增和殺傷能力都得到了明顯的改善，因此研究者們將其應用于實體瘤的治療中，并研究不同腫瘤抗原作為靶點時CAR-T的治療效果。

雖然CAR-T在治療實體瘤中取得了初步的療效，但其藥效遜于血液瘤。這主要與實體瘤的特性相關，與血液瘤相比，實體瘤治療需要解決更多的難題。除去少數研究使用的瘤內注射方式，CAR-T的給藥方式主要還是集中在靜脈輸注，CAR-T細胞需要從外周血中循環至腫瘤部位才能發揮殺傷作用。相較于血液瘤所處的均質環境，實體瘤所處的環境復雜多變，阻礙了CAR-T的浸潤。CAR-T療法無疑為癌癥治療帶來新希望，然而，這種療法也有嚴重不良反應，主要是細胞因子釋放綜合征(也叫細胞因子釋放風暴，CRS)和神經毒性。如果處理不及時可能會危及生命。所以輸注CAR-T細胞后必須嚴密監測。

腫瘤微環境是指腫瘤產生和生存的內環境，主要由腫瘤細胞、細胞外基質、周圍血管、其他細胞(如免疫細胞和成纖維細胞)以及各種分泌因子等組成。越來越多的研究表明，抑制性腫瘤微環境促進了腫瘤的生長和轉移，阻礙了免疫細胞的應答并抑制抗腫瘤療法的療效。

發明內容

發明目的：針對上述CAR-T在實體瘤中面對的困境，本申請提供了PARP抑制劑聯合CAR-T細胞在制備抗腫瘤藥物中的應用。

技術方案：本申請公開了PARP抑制劑聯合CAR-T細胞在制備抗腫瘤藥物中的應用。

其中，所述PARP抑制劑優選為Olaparib。

所述PARP抑制劑促進CAR-T細胞在腫瘤微環境中的浸潤。

進一步的，所述PARP抑制劑促進CD8⁺CAR-T細胞在腫瘤微環境中的浸潤，減少CD4⁺CAR-T細胞在腫瘤微環境中的浸潤。

其中，所述CAR-T細胞為低劑量2.5×10⁶CAR-T/mice。

本申請還公開了PARP抑制劑在制備用于CAR-T細胞治療的輔助劑中的用途。

其中，所述PARP抑制劑優選為Olaparib。

所述PARP抑制劑促進CAR-T細胞在腫瘤微環境中的浸潤。

進一步的，所述PARP抑制劑促進CD8⁺CAR-T細胞在腫瘤微環境中的浸潤，減少CD4⁺CAR-T細胞在腫瘤微環境中的浸潤。

具體地，本申請根據動物實驗，PARP抑制劑50mg/kg劑量一周內給藥4次，并在每兩次之間注射CAR-T細胞，可以有效的促進CAR-T細胞在腫瘤微環境中的浸潤，顯著的促進腫瘤負荷小鼠腫瘤的消退。