[發明專利]熒光定量PCR試劑盒、反應系統及核酸定量檢測方法

有效

• 申請號: 202110007663.6
• 申請日: 2021-01-05
• 公開（公告）號: CN114134208B
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發明（設計）人: 張良祿;董蘭蘭;李婷婷
• 申請（專利權）人: 武漢艾米森生命科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851;C12Q1/6886
• 代理公司: 深圳紫藤知識產權代理有限公司 44570
• 代理人: 張曉薇

1.一種熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，包括引物，以及兩條以上的熒光探針，其中所述兩條以上的熒光探針均具有與PCR模板互補的結合位點，所述PCR模板為單鏈DNA，且所述兩條以上的熒光探針均互補結合于同一條核苷酸鏈。

2.根據權利要求1所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，所述單鏈DNA為雙鏈DNA經轉化得到的兩條不互補的核苷酸鏈，所述引物包括第一引物對和第二引物對，所述第一引物對和第二引物對能夠分別擴增所述兩條不互補的核苷酸鏈生成互補鏈。

3.根據權利要求2所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，所述兩條以上的熒光探針互補結合于所述單鏈DNA或其互補鏈中的同一條核苷酸鏈。

4.根據權利要求3所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，所述兩條不互補的核苷酸鏈分別包括如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，以及如SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列；

所述第一引物對如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示，所述第二引物對如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示；

所述熒光探針包括如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ IDNO.11、和SEQ ID NO.12所示的探針，其中，所述SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的熒光探針可以互補結合于SEQ IDNO.2所示的核苷酸序列或其互補鏈，所述SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示的熒光探針可以互補結合于SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列或其互補鏈。

5.權利要求1-4任一項所述的熒光定量PCR試劑盒在制備基因檢測試劑中的應用。

6.根據權利要求5所述的熒光定量PCR試劑盒在制備基因檢測試劑中的應用，其特征在于，所述基因檢測試劑為SDC2基因甲基化檢測試劑。

7.一種熒光定量PCR系統，其特征在于，包括：

模板、引物及兩條以上的熒光探針，其中，所述模板為單鏈DNA，所述兩條以上的熒光探針均具有與所述模板互補的結合位點，且均互補結合于同一條核苷酸鏈。

8.根據權利要求7所述的熒光定量PCR系統，其特征在于，所述模板含兩條互補或反向互補核苷酸鏈的單鏈DNA，所述兩條以上的熒光探針可以互補結合于所述模板中的同一條或不同的核苷酸鏈。

9.一種非診斷目的的核酸定量檢測方法，其特征在于，是采用權利要求1至4任一項中所述的熒光定量PCR試劑盒進行熒光定量PCR檢測，或者是采用如權利要求7或8所述的一種熒光定量PCR系統。