[發(fā)明專利]一種重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌及其在降解多環(huán)芳烴廢水中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110004682.3
• 申請(qǐng)日: 2021-01-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113151124A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡永紅;彭妍娟;楊文革;郭宏山;高會(huì)杰;陳明翔;章恒基;唐笑涵;陳昳悅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/21
• 分類號(hào): C12N1/21;C12N15/74;C02F3/34;C02F101/32;C12R1/01
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

1.一種重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌，其特征在于，所述的重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌是通過(guò)將乙二醛酶基因過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)入嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌中得到的能夠過(guò)表達(dá)乙二醛酶的基因工程菌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌，其特征在于，所述嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌為CGMCC1.14975。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌，其特征在于，所述的乙二醛酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌，其特征在于，所述的乙二醛酶基因過(guò)表達(dá)載體的出發(fā)載體為pXMJ 19。

5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的構(gòu)建方法，其特征在于，包含以下步驟：

(1)以嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌CGMCC1.14975的基因組DNA為模板，以SEQ ID NO.3和SEQ IDNO.4所示引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到SEQ ID NO.2所示的含乙二醛酶基因的片段；

(2)將步驟(1)得到的乙二醛酶基因片段克隆到出發(fā)載體上，得到重組質(zhì)粒；

(3)將步驟(2)得到的重組質(zhì)粒導(dǎo)入嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌中，篩選得到過(guò)表達(dá)乙二醛酶的重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的出發(fā)載體為pXMJ19。

7.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌在降解多環(huán)芳烴中的應(yīng)用。

8.一種處理含多環(huán)芳烴廢水的方法，其特征在于，包含向待處理的含多環(huán)芳烴廢水中加入預(yù)處理后的固定化載體、培養(yǎng)基成分、重組嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌種子液，批次發(fā)酵，得到處理合格的廢水；其中，每一批發(fā)酵結(jié)束后，用新的待處理廢水代替前一批得到的發(fā)酵液；所述的培養(yǎng)基成分為蛋白胨、磷酸二氫鉀和無(wú)水硫酸鎂，使廢水中蛋白胨終濃度為5g/L、磷酸二氫鉀終濃度為1g/L、無(wú)水硫酸鎂終濃度為0.5g/L。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述的固定化載體為棉纖維織物、無(wú)紡布、聚酯纖維、聚乙烯醇纖維、沸石、細(xì)菌纖維素膜、絲綢、甘蔗渣和玉米秸稈中的任意一種或幾種的組合；所述的預(yù)處理為將固定化載體剪成3-9cm*3-9cm的正方形，用純水洗凈干燥后于乙醇中浸泡，再用純水清洗后沸水浴10-40min后干燥；固定化載體的用量為5-15g/500ml待處理廢水。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述發(fā)酵的條件為在28-34℃，通氧條件下培養(yǎng)60-90h。