[發(fā)明專利]用于蛋白質(zhì)表達的系統(tǒng)和方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202080079474.3
• 申請日: 2020-09-15
• 公開（公告）號: CN114761565A
• 公開（公告）日: 2022-07-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: B·梅廷斯;T·福利亞德
• 申請（專利權(quán)）人: 伊克賽普根公司
• 主分類號: C12N15/79
• 分類號: C12N15/79;C12N15/63;C12N15/41;C07K14/085;A61K38/16
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 陳迎春;黃革生

1.一種用于在真核細胞中重組表達靶蛋白的系統(tǒng)，其包含一個或多個載體，所述一個或多個載體包含：

a)編碼靶蛋白的第一多核苷酸；和

b)編碼增強子蛋白的第二多核苷酸，其中：

i)所述增強子蛋白是核質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白(NCT)的抑制劑，和/或

ii)所述增強子蛋白選自小核糖核酸病毒前導(dǎo)(L)蛋白、小核糖核酸病毒2A蛋白酶、鼻病毒3C蛋白酶、單純皰疹病毒(HSV)ICP27蛋白和彈狀病毒基質(zhì)(M)蛋白，

其中第一多核苷酸和第二多核苷酸可操作地連接至一個或多個啟動子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中所述增強子蛋白是核質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白(NCT)的抑制劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的系統(tǒng)，其中NCT抑制劑是病毒蛋白。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的系統(tǒng)，其中NCT抑制劑選自小核糖核酸病毒前導(dǎo)(L)蛋白、小核糖核酸病毒2A蛋白酶、鼻病毒3C蛋白酶、冠狀病毒ORF6蛋白、埃博拉病毒VP24蛋白、委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒(VEEV)衣殼蛋白、單純皰疹病毒(HSV)ICP27蛋白和彈狀病毒基質(zhì)(M)蛋白。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng)，其中所述NCT抑制劑是小核糖核酸病毒前導(dǎo)(L)蛋白或其功能變體。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng)，其中所述NCT抑制劑是小核糖核酸病毒2A蛋白酶或其功能變體。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng)，其中所述NCT抑制劑是鼻病毒3C蛋白酶或其功能變體。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng)，其中所述NCT抑制劑是冠狀病毒ORF6蛋白或其功能變體。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng)，其中所述NCT抑制劑是埃博拉病毒VP24蛋白或其功能變體。

10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng)，其中所述NCT抑制劑是委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒(VEEV)衣殼蛋白或其功能變體。

11.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng)，其中所述NCT抑制劑是單純皰疹病毒(HSV)ICP27蛋白或其功能變體。

12.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng)，其中所述NCT抑制劑是彈狀病毒基質(zhì)(M)蛋白或其功能變體。

13.根據(jù)權(quán)利要求5所述的系統(tǒng)，其中所述L蛋白是Theiler氏病毒的L蛋白或其功能變體。

14.根據(jù)權(quán)利要求5所述的系統(tǒng)，其中所述L蛋白與SEQ ID NO：1共有至少90％的同一性。

15.根據(jù)權(quán)利要求5所述的系統(tǒng)，其中所述L蛋白是腦心肌炎病毒(EMCV)的L蛋白或其功能變體。

16.根據(jù)權(quán)利要求5所述的系統(tǒng)，其中所述L蛋白與SEQ ID NO：2共有至少90％的同一性。

17.根據(jù)權(quán)利要求5所述的系統(tǒng)，其中所述L蛋白選自脊髓灰質(zhì)炎病毒的L蛋白、HRV16的L蛋白、孟戈病毒的L蛋白和Saffold病毒2的L蛋白或其功能變體。

18.根據(jù)權(quán)利要求1-17中任一項所述的系統(tǒng)，其中所述系統(tǒng)包括包含表達盒的單個載體，所述表達盒包含第一多核苷酸和第二多核苷酸。

19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的系統(tǒng)，其中所述表達盒包含與第一多核苷酸可操作地連接的第一啟動子；和與第二多核苷酸可操作地連接的第二啟動子。