[發明專利]用于確定人血漿樣本中的β-淀粉樣蛋白42/40比率的多重測定

在審

• 申請號: 202080049343.0
• 申請日: 2020-05-08
• 公開（公告）號: CN114072678A
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: K·R·莫諾;B·G·桑索西
• 申請（專利權）人: 奎斯特診斷投資有限責任公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/53
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 封新琴

1.一種用于制備用于檢測β-淀粉樣蛋白42(“Aβ42”)至β-淀粉樣蛋白40(“Aβ40”)中的至少一種的體液樣品的方法，所述方法包括：

獲得來自受試者的體液樣品；以及

通過將所述體液樣品在緩沖溶液中孵育使所述體液樣品中的Aβ42和Aβ40中的至少一種與內源性蛋白解離，所述緩沖溶液包含：

緩沖液；和

蛋白質可相容的表面活性劑，

其中將所述體液樣品在所述緩沖溶液中孵育至少30分鐘。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述緩沖溶液包含在0.005vol.-％與5.0vol.-％之間的所述蛋白質可相容的表面活性劑。

3.根據權利要求1或權利要求2所述的方法，其中將所述體液樣品在所述緩沖溶液中稀釋約4與約16之間的倍數。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其中所述蛋白質可相容的表面活性劑包含聚山梨醇酯20、Triton X-100或其混合物。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，其中所述體液選自血液、血漿、血清、淋巴液、腦脊液、滑液、尿液和唾液。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，其中將所述體液樣品在所述緩沖溶液中孵育至少大約30分鐘但是不多于大約4小時。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的方法，所述方法進一步包括將所述體液樣品在所述緩沖溶液中孵育后對所述體液樣品進行免疫測定，以確定Aβ42和Aβ40中的至少一種的濃度。

8.根據權利要求7所述的方法，所述方法進一步包括：確定Aβ42和Aβ40的濃度，并且計算在所述體液樣品中Aβ42與Aβ40的比率。

9.根據權利要求8所述的方法，其中計算Aβ42與Aβ40的比率包括：

從至少所述第一可檢測信號計算Aβ42的劑量(D)；

從至少所述第二可檢測信號計算Aβ40的劑量(D)；以及

校正Aβ42和Aβ40的劑量(D)以確定Aβ42和Aβ40在所述體液中的濃度。

10.根據權利要求8或權利要求9所述的方法，其中根據以下關系從所述劑量(D)確定Aβ42在所述體液中的濃度：

并且

其中根據以下關系從所述劑量(D)確定Aβ40在所述體液中的濃度：

其中C₁、C₂和C₃是校正因子。

11.根據權利要求10所述的方法，其中C₁是大約2.4271，C₂是大約0.9196，并且C₃是大約0.35。

12.根據權利要求7-11中任一項所述的方法，其中所述免疫測定包括ELISA。

13.根據權利要求1-12中任一項所述的方法，其中所述受試者患有神經退行性障礙、被懷疑患有神經退行性障礙、正在經受神經退行性障礙的治療、具有患上神經退行性障礙的風險、或被懷疑具有患上神經退行性障礙的風險。

14.一種用于確定在體液中Aβ42與Aβ40的比率的方法，所述方法包括：

根據權利要求1-6中任一項所述的方法制備用于檢測Aβ42和Aβ40中的至少一種的體液樣品以產生游離肽分子；以及

對所述體液樣品進行免疫測定，

其中從單一多重測定同時確定Aβ42和Aβ40在所述體液樣品中的濃度。