[發明專利]用于微生物的長期監控的新型取樣方法

在審

• 申請號: 202080021115.2
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN113544283A
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: M·博巴爾;A·維特;P·梅斯特;P·羅斯馬尼特
• 申請（專利權）人: 默克專利股份公司
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12Q1/689;C12Q1/04;C12Q1/22
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍;黃希貴

1.一種用于檢測表面上的生物污染物的方法，包括以下順序步驟：

i. 提供載體，所述載體包含一塊或多塊無菌纖維材料和用于將所述載體附著至表面的黏著部分，

ii. 將所述載體附著至所述表面，

iii. 從所述表面收集至少一塊所述纖維材料，

iv. 在溶劑中溫育所述至少一塊纖維材料，和

v. 對所述溶劑進行生物污染物的存在的分析。

2.權利要求1的方法，其中使用至少2塊纖維材料，具體地使用至少3、4、5或6塊纖維材料。

3.權利要求1或2的方法，其中所述黏著部分是應用于所述無菌纖維材料一側的至少一部分的粘合劑，具有粘合劑的紙、塑料或金屬層，或可以固定到表面的塑料或金屬支撐物。

4.權利要求1-3中一項或多項的方法，其中所述載體包括至少兩個部分，任選地由穿孔線分開。

5.權利要求1-4中一項或多項的方法，其中所述生物污染物是細菌，具體地單核細胞增生李斯特氏菌或大腸桿菌，真菌，或病毒，且對所述溶劑進行選自蛋白質、肽和核酸分子，具體地DNA或RNA的生物污染物的部分的分析。

6.權利要求1-5中一項或多項的方法，其中所述溶劑選自緩沖液，具體選自具有溶劑、表面活性劑、去污劑的緩沖液，不具有溶劑、表面活性劑、去污劑的緩沖液，Tris/EDTA；離液溶劑，有機溶劑，離子液體。

7.權利要求1-6中一項或多項的方法，其中使用PCR、qPCR、下一代測序（NGS）、酶聯免疫吸附測定（ELISA）或其他免疫測定來對所述溶劑進行生物污染物或生物污染物的部分的分析。

8.權利要求1-7中一項或多項的方法，其中所述生物污染物是單核細胞增生李斯特氏菌，且對溶劑進行單核細胞增生李斯特氏菌基因prfA的存在的分析，和/或所述生物污染物是大腸桿菌并且對溶劑進行大腸桿菌基因sfmD的存在的分析。

9.權利要求1-8中一項或多項的方法，其中將所述纖維材料附著至表面達1小時至2周的時間。

10.權利要求1-9中一項或多項的方法，其中所述載體使用物理或化學滅菌方法滅菌，具體選自紫外輻射、γ輻射、電子束輻射、X射線輻射、用亞原子粒子輻射、等離子體、干熱、高壓滅菌、臭氧、過氧化氫、過乙酸、二氧化氮、環氧乙烷、次氯酸鹽和DNA酶。

11.權利要求1-10中一項或多項的方法，其中所述纖維材料為無機或有機纖維材料，具體選自活性炭、微孔陶瓷、多孔金屬、氧化鋁、玻璃纖維、紙、纖維素、纖維素酯、纖維素醚、乙酸纖維素、黏膠、玻璃紙、藻酸鹽、尼龍膜、聚酯（PETE）、聚丙烯、聚四氟乙烯（PTFE）、聚偏1,1-二氟乙烯、聚偏氟乙烯（PVDF）、聚碳酸酯（PCTE）、聚醚醚酮（PEEK）、聚丙烯腈（PAN）、聚芳酰胺（KEVLAR）和聚醚砜（PES），且其中所述黏著部分選自膠帶，具體地選自聚乙烯膜、聚丙烯膜、聚酯膜、聚氯乙烯（PVC）、纖維素膜、塑料石蠟膜和金屬箔。

12. 權利要求1-12中一項或多項的方法，其中所述一塊或多塊纖維材料包括至少10mm²，優選50-300 mm²，更優選50-100 mm²的表面面積。

13.權利要求1-12中一項或多項的方法用于監控，具體地長期監控生物污染物的用途。

14.載體，所述載體包含一塊或多塊纖維材料和用于將所述載體附著至表面的黏著部分，由此所述載體是無菌的且包括編碼。

15.根據權利要求14的載體，由此所述載體補充有抑菌或殺菌劑組合物。