[發明專利]用于使用基因組編輯產生顯性矮株型等位基因的方法和組合物

在審

• 申請號: 202080020110.8
• 申請日: 2020-05-28
• 公開（公告）號: CN113557408A
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發明（設計）人: S·曼朱納斯;L·A·賴默奎斯;T·L·斯勒溫斯基
• 申請（專利權）人: 孟山都技術公司
• 主分類號: G01F1/56
• 分類號: G01F1/56
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 孟凡宏;袁森

1.一種包含內源性GA20氧化酶_3基因座的突變等位基因的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述突變等位基因包含插入至所述內源性GA20氧化酶_3基因座中的DNA區段，其中所述DNA區段編碼與SEQ ID NO:1-3以及5-7中的一者或多者的至少20個連續核苷酸至少70％互補的反義RNA序列，并且其中所述內源性GA20氧化酶_3基因座的所述突變等位基因產生包含所述反義RNA序列的RNA轉錄物。

2.如權利要求1所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述內源性GA20氧化酶_3基因座的所述突變等位基因阻抑所述內源性GA20氧化酶_3基因座的野生型等位基因、內源性GA20氧化酶_5基因座的野生型等位基因、或兩者的表達。

3.如權利要求1所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述RNA轉錄物還包含所述內源性GA20氧化酶_3基因座的一種或多種選自由以下組成的組的序列元件：5′UTR、第1外顯子、第1內含子、第2外顯子、第2內含子、第3外顯子、3′UTR、以及它們的任何部分。

4.如權利要求1所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述DNA區段包含來源于所述內源性GA20氧化酶_3基因座的核苷酸序列。

5.如權利要求4所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述DNA區段對應于所述內源性GA20氧化酶_3基因座的倒置基因組片段。

6.如權利要求1所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述DNA區段包含來源于內源性GA20氧化酶_5基因座的核苷酸序列。

7.如權利要求6所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述DNA區段對應于所述內源性GA20氧化酶_5基因座的倒置基因組片段。

8.如權利要求1所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述反義RNA序列的至少一部分與所述RNA轉錄物的相應內源性序列至少70％互補。

9.如權利要求8所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述RNA轉錄物的所述相應內源性序列與SEQ ID NO:1-3以及5-7中的一者或多者的至少20個連續核苷酸至少85％同一。

10.如權利要求8或9所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述DNA區段插入在所述內源性GA20氧化酶_3基因座的相應內源性DNA區段的附近或鄰近處。

11.如權利要求10所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述反義RNA序列與所述RNA轉錄物的所述相應內源性序列形成莖-環結構。

12.如權利要求10所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述突變等位基因的插入DNA區段和所述相應內源性DNA區段由間插DNA序列分隔。

13.如權利要求12所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述間插DNA序列包含所述內源性GA20氧化酶_3基因座的天然序列。

14.如權利要求12所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述間插DNA序列包含插入至所述內源性GA20氧化酶_3基因座中的外源性序列。

15.如權利要求8所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述DNA區段插入在選自由以下組成的組的區域內：所述內源性GA20氧化酶_3基因座的5′非翻譯區(UTR)、第1外顯子、第1內含子、第2外顯子、第2內含子、第3外顯子和3′UTR、以及它們的組合。

16.如權利要求8所述的經修飾玉米植物或其植物部分，其中所述DNA區段插入在通過靶向編輯技術識別以創建雙鏈斷裂(DSB)的基因組位點處。