[實用新型]一種快速檢測四環素的免疫膠體金試劑板

有效

• 申請號: 202023167589.4
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN214225183U
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 桑麗雅;楊科;葉茂;沈曉玲;陳青舟;張少恩
• 申請（專利權）人: 杭州南開日新生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/566;G01N33/577;G01N33/532
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• 代理人: 暫無信息

本實用新型涉及一種快速檢測四環素的免疫膠體金試劑板，試劑板包括膠體金試紙條和塑料外殼，試紙條由底板以及依次粘于底板上的樣品墊、金標墊、緩沖墊、反應膜和吸水墊組成，反應膜上沿層析方向依次設有檢測線T線和質控線C線。本實用新型提供的試劑板能夠快速檢測四環素，且靈敏度高、顯色均勻，操作更加簡便，適用于大量樣本的快速檢測。

技術領域

本實用新型涉及免疫膠體金檢測領域，具體涉及一種快速檢測四環素的免疫膠體金試劑板。

背景技術

四環素是由鏈霉菌產生的一種廣譜抗生素，在畜禽、水生生物等產業領域應用此類藥物對動物進行診斷、預防和治療疾病，以及促進動物生長、提高飼料轉化率，帶來了可觀的經濟效益。但是，長期食用這種動物食品及其制品，必然會危及人類的健康。四環素藥物的毒性反應主要表現在對胃、腸、肝臟的損害，以及牙齒的染色，還會造成過敏反應、二重感染、致畸胎作用。目前，四環素造成的動物性食品的藥物殘留，已經對人類健康構成了潛在的危害。歐美、日本及中國均要求其限量使用。

目前，食品中四環素殘留常用的檢測方法主要是儀器法和免疫分析法。儀器法，如高效液相色譜法(HPLC)、液-質聯用(LC-MS)等，具有特異性好、準確率高的特點，但由于存在對設備、環境、操作技能等要求，且檢測周期長，不利于大規模樣本篩選。免疫分析法，如酶聯免疫吸附法(ELISA)，具有檢測量大，操作相對簡單等優點，但是該法同樣需要實驗室設備，分析時間較長，具有一定局限性。

現有的免疫膠體金試劑板產品用于檢測牛奶中四環素的殘留，靈敏度較低為5ppb，且存在T線、C線的線條寬度和顏色深淺不一致等問題。部分廠家通過先將樣品液與金標在金標微孔中充分反應，再滴加試紙條進行檢測，解決試劑板顯色不均一的問題，但增加了操作步驟和出錯率，降低檢測效率。因此，開發一種靈敏度高、操作簡便、顯色好的檢測四環素的膠體金試劑板具有重要意義。

發明內容

本實用新型的目的在于提供一種靈敏度高、操作簡便、顯色好的檢測四環素的免疫膠體金試劑板。

本實用新型提供的一種快速檢測四環素的免疫膠體金試劑板，包括膠體金試紙條和塑料外殼；所述膠體金試紙條由底板以及依次粘于底板上的樣品墊、金標墊、緩沖墊、反應膜和吸水墊組成。

所述金標墊上包被有膠體金標記的抗四環素單克隆抗體；所述緩沖墊包被有緩沖溶液；所述反應膜上沿層析方向依次設有檢測線T線和質控線C線；其中，T線上包被有四環素-載體蛋白偶聯物，C線上包被羊抗鼠IgG二抗。

本實用新型中，所述T線和C線的間隔為4～6 mm。作為優選，所述T線和C線的間隔為5 mm。

本實用新型中，所述試紙條的樣品墊、金標墊、緩沖墊、反應膜和吸水墊相鄰各部分間均有1～2 mm的重疊，其目的一方面是保證層析作用從樣品墊到吸水墊部位順利進行，另一方面是為了使樣品溶液從樣品墊經金標結合墊至反應膜有充分反應時間，保證樣品溶液中的有效成分與金標結合墊中的金標抗體順利發生反應。

本實用新型中，所述底板為PVC板，所述樣品墊、緩沖墊和金標墊由玻璃纖維膜制成，所述反應膜為NC膜，所述吸水墊為濾紙。

本實用新型中，所述四環素-載體蛋白的偶聯物中，載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白或血藍蛋白。作為優選，載體蛋白為牛血清白蛋白。

本實用新型中，所述的塑料外殼起固定膠體金試紙條及標示功能，塑料外殼上設有加樣孔和觀察窗。通過觀察窗可以觀察C線和T線的顯色情況。

使用本實用新型提供的試劑板進行檢測時，先將一定量的樣品前處理液滴至加樣孔S，靜置等待幾分鐘后觀察試紙條上檢測線和控制線顏色深淺，操作流程如圖2所示。按照圖3所示的判讀方法判定檢測樣本中四環素殘留情況。判讀方法為：T線顯色比C線強或者一樣強，為陰性；T線沒有顯色或顯色比C線弱，為陽性； C線不顯色，不論T有無顯色均為無效。