[實用新型]一種雞Wnt3a基因熒光定量RT-PCR試劑盒

有效

• 申請號: 202020113091.0
• 申請日: 2020-01-17
• 公開（公告）號: CN212051472U
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 姬改革;束婧婷;章明;單艷菊;劉一帆;屠云潔;鄒劍敏;巨曉軍
• 申請（專利權）人: 江蘇省家禽科學研究所
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851;C12Q1/6888
• 代理公司: 揚州潤中專利代理事務所(普通合伙) 32315
• 代理人: 李楠

本實用新型屬于生物技術領域，具體公開了一種雞Wnt3a基因熒光定量RT?PCR試劑盒，包括盒體(4)，盒體(4)內設有DNA雙鏈嵌合綠色染料熱啟動熒光PCR混合物(3)、雞Wnt3a基因表達的特異性正反向引物(5)、定量PCR參比染料(6)、雞內參基因β?actin表達的特異性正反向引物(7)、滅菌無核酸酶水(8)。本實用新型主要用于雞Wnt3a基因表達調控和皮膚毛囊發育相關的功能研究，試劑盒準確性高、快速、價格低廉。

技術領域

本實用新型屬于生物技術領域，尤其涉及雞Wnt3a基因表達熒光定量RT-PCR試劑盒，主要用于雞Wnt3a基因表達調控和皮膚毛囊發育相關的功能研究。

背景技術

Wnt信號通路在動物的生長發育中扮演著多種關鍵角色，如神經系統發育、骨骼肌發育、皮膚毛囊的生長發育等。Wnt3a基因是Wnt信號通路的重要成員，被認為在毛囊的形態發生、發育、分布及生長周期中起著至關重要的作用。Wnt3a能夠促進生黑色素細胞增殖和分化，在皮膚顏色變黑方面起重要的作用，同時在毛囊的不同的發育階段起重要作用。膚色和毛囊密度的大小作為雞的重要經濟性狀，是肉雞產業關注的重要性狀之一。研究Wnt3a基因的表達調控對于了解雞皮膚毛囊的生長發育調控機理具有重要意義。

實用新型內容

為了解決以上技術問題，本實用新型提供一種雞Wnt3a基因表達熒光定量RT-PCR檢測試劑盒，本實用新型試劑盒準確性高、快速、價格低廉，通過本實用新型建立實時熒光定量 RT-PCR技術檢測雞Wnt3a基因表達的方法，為研究雞Wnt3a表達調控以及皮膚毛囊生長發育調控奠定基礎，為優質雞育種提供理論依據，具有潛在的應用價值。

本實用新型的目的是通過以下技術方案實現的，雞Wnt3a基因熒光定量RT-PCR試劑盒，包括盒體，盒體內設有DNA雙鏈嵌合綠色染料(SYBR Green Master)熱啟動熒光PCR混合物、雞Wnt3a基因表達的特異性正反向引物、雞內參基因β-actin表達的特異性正反向引物、定量PCR參比染料(ROX)、滅菌無核酸酶水(DEPC)。

其中，雞Wnt3a基因表達的特異性正反向引物為：

F:5，—ACTGAGAAGGACCTGGTTT—3，

R:5，—ATGGGAAGTGACGTTACAGA—3；

以及雞內參基因β-actin表達的特異性正反向引物序列為:

F:5，—TGCTGTGTTCCCATCTATCG—3，

R:5,—TTGGTGACAATACCGTGTTCA—3。

優選的，試劑盒還包括盒蓋，盒蓋與盒體螺紋連接。

優選的，所述盒體內設有若干個容納腔，容納腔中對應設置DNA雙鏈嵌合綠色染料(SYBR Green Master)熱啟動熒光PCR混合物、雞Wnt3a基因表達的特異性正反向引物、定量PCR參比染料(Rox)、雞內參基因β-actin表達的特異性正反向引物、滅菌無核酸酶水(DEPC)對應的試劑管；

所述容納腔的內壁上設有定位槽組，包括第一定位槽、第二定位槽，第一定位槽沿容納腔軸向設置，第二定位槽沿容納腔周向設置，第一定位槽、第二定位槽相連通；試劑管上設有定位凸起，定位凸起分別與第一定位槽、第二定位槽相配合。

優選的，所述容納腔的內壁上設有兩個定位槽組，兩個定位槽組呈中心對稱結構；所述試劑管上設有2個定位凸起，2個定位凸起對稱設置。

優選的，所述第一定位槽、第二定位槽組成L形結構。

上述雞Wnt3a基因熒光定量RT-PCR試劑盒的使用方法如下：

(1)組織RNA的抽提與純化：從雞組織中提取總RNA并純化；