[發明專利]基因敲除小鼠在制備限制型心肌病動物模型中的應用

有效

• 申請號: 202011643472.0
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112841128B
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發明（設計）人: 楊曉;李振華;王劍;王添樂;侯寧
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A01K67/027
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 張羽

1.基因敲除小鼠在制備限制型心肌病動物模型中的應用，其特征在于：所述基因敲除小鼠心肌細胞不表達Hgs基因及其編碼蛋白，所述基因敲除小鼠的構建方法包括如下步驟：

將Hgs^fl/fl小鼠和α-MHC-Cre小鼠交配得到F1代小鼠；

所述Hgs^fl/fl小鼠是將C57BL/6J小鼠的Hgs基因替換為Hgs^fl等位基因，Hgs^fl等位基因是將所述Hgs基因的第843-9369位替換為SEQ ID No.3所示的片段，保持所述Hgs基因的其它核苷酸序列不變得到的Hgs基因突變體；

所述α-MHC-Cre小鼠為心肌細胞特異性表達Cre重組酶的轉基因小鼠；

選擇所述F1代小鼠中的雙陽性雜合子小鼠，命名為α-MHC-Cre；Hgs^fl/+小鼠，所述α-MHC-Cre；Hgs^fl/+小鼠的一條染色體攜帶所述Hgs基因，另一條染色體攜帶所述Hgs^fl等位基因，且所述α-MHC-Cre；Hgs^fl/+小鼠在心肌細胞特異性表達Cre重組酶；

所述α-MHC-Cre；Hgs^fl/+小鼠和所述Hgs^fl/fl小鼠交配得到F2代小鼠；

選擇所述F2代小鼠中的雙陽性純合子小鼠，命名為α-MHC-Cre；Hgs^fl/fl小鼠，所述α-MHC-Cre；Hgs^fl/fl小鼠為所述基因敲除小鼠，所述α-MHC-Cre；Hgs^fl/fl小鼠的兩條染色體均攜帶所述Hgs^fl等位基因，且所述α-MHC-Cre；Hgs^fl/fl小鼠在心肌細胞特異性表達Cre重組酶。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述α-MHC-Cre小鼠攜帶包括α-MHC基因啟動子和Cre重組酶基因的目的片段，所述α-MHC基因啟動子啟動所述Cre重組酶基因的表達。

3.權利要求1或2所述應用中的所述基因敲除小鼠的構建方法。

4.權利要求3所述的構建方法構建的基因敲除小鼠在開發或篩選預防和/或治療心肌病藥物或在限制型心肌病研究中的應用。