[發明專利]一種獲得工業大麻全雌性或全雄性種苗的方法

在審

• 申請號: 202011642236.7
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112602597A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 李成剛;賈永玲
• 申請（專利權）人: 濟南浩隆生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 濟南知來知識產權代理事務所(普通合伙) 37276
• 代理人: 曹麗

1.一種獲得工業大麻全雌性或全雄性種苗的方法，其特征是：包括以下步驟：

(1)單性外植體的培養、獲取

大麻開花季節，從健壯的雌性植株上選取頂端莖段，用消毒后的剪刀把頂部8-12cm的莖段剪切下來消毒；

(2)外植體材料滅菌

先用流水沖洗，再用新潔爾滅浸泡，洗凈后剪成莖段后進行消毒處理：無菌水震蕩沖洗，75％的酒精震蕩沖洗，無菌水震蕩沖洗2～5min，0.1％的氯化汞溶液，滴入2～5滴吐溫80，震蕩沖洗，無菌水震蕩；

(3)滅菌后材料的培養

將消毒后的莖段用剪去傷口，將莖段剪成帶有1-2個芽的莖段，接種于空白MS培養基中，接種完的外植體放置于培養間，進行培養；

(4)分化培養

將步驟3培養后帶有幼芽的莖段，用手術剪剪去下端，然后插入到分化培養基中，分化培養基配方如下：MS+0.5～1.2mg·L^-16-BA+0.2～0.5mg·L^-1ZT+0.1～0.5mg·L^-1KT+25g·L^-1蔗糖+5g·L^-1瓊脂粉(瓊脂粉凝膠強度為1300g/cm²)；將接種后的幼苗放置于培養間培養；優選的：培養條件：溫度25℃±1℃，濕度30％-50％，光照強度2500lx-4000lx，光照時間14h-16h，培養周期25-30d。

(5)繼代擴繁培養

分化培養結束后，幼苗轉接到繼代培養基中進行繼代擴繁培養；繼代擴繁培養基為：

MS+0.2～1.0mg·L^-16-BA+0.3～1.5mg·L^-1IAA+0.1～0.5mg·L^-1ZT+0.1～0.2mg·L^-1KT+25g·L^-1蔗糖+5g·L^-1瓊脂粉；

(6)生根培養

將4cm以上健壯的幼苗分成單棵，接到生根培養基中；生根培養基如下：WH+0.1～1.0mg·L^-1IAA+0.05～0.5mg·L^-1NAA+30g·L^-1蔗糖+5g·L^-1瓊脂粉(瓊脂粉凝膠強度為1300g/cm²)+0.2g·L^-1活性炭；

(7)溫室馴化

當80％幼苗根長度大于3cm時，進行洗苗并定植到50孔的穴盤內，基質配比為草炭：珍珠巖：蛭石＝5-7：1-2：0.5-1，35天左右就可獲得能定植到大田全雌或全雄工業大麻種苗。

2.如權利要求1所述的方法，其特征是：所述步驟(4)培養條件如下：溫度25℃±1℃，濕度30％-50％，光照強度2500lx-4000lx，光照時間14h-16h；20-25d轉瓶繼續培養，直至分化出新芽。

3.如權利要求1所述的方法，其特征是：所述步驟(5)培養條件如下：培養條件：溫度25℃±2℃，濕度30％-60％，光照強度2500lx-5000lx，光照時間14h-17h，培養周期25-35d。

4.如權利要求1所述的方法，其特征是：所述步驟(6)培養條件如下：溫度25℃±2℃，濕度35％-60％，光照強度2500-4500lx，光照時間14-16h。培養25-35d，便可有根生出。

5.權利要求1-4任一所述的方法培育得到的工業大麻全雌性或全雄性種苗。

6.權利要求5所述的種苗在制備二氫大麻酚中的應用。