[發明專利]塞尼卡谷病毒3D蛋白在制備免疫應答誘導劑或者佐劑中的應用

有效

• 申請號: 202011641840.8
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112587660B
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 鄭海學;馬旭升;莫希丁·喬杜里;曾宗波;曹偉軍;羅志寬;朱紫祥;楊帆;張克山;田宏;黨文;馮濤;王琦;劉會勝
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蘭州獸醫研究所
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/125;A61P29/00;A61P31/14
• 代理公司: 鄭州大通專利商標代理有限公司 41111
• 代理人: 張立強

本發明屬于病毒免疫學領域，尤其是涉及SVA的3D蛋白的新功能，如：3D蛋白可作為NLRP3介導的炎癥信號轉導激活劑進行應用，3D蛋白激活了IL?1β的產生和分泌。同時發現了3D蛋白通過其N端1～154aa與NLRP3的NATCH結構域相互作用，并以調控鈣離子和鉀離子的細胞內的濃度變化方式激活細胞內NLRP3炎癥小體介導的IL?1β的產生和分泌。本發明為為SVA的防控以及3D蛋白可以作為佐劑激活炎癥反應提供了新的靶點和理論支持。

技術領域

本發明屬于生物技術領域和病毒免疫學領域，尤其是涉及SVA（Senecavirus A）的蛋白3D的新功能，即SVA 3D蛋白可以誘導IL-1β的分泌，最終導致SVA病毒復制降低，起到促進免疫反應的作用。

背景技術

炎癥是身體自然愈合過程的一部分，但是當它變成慢性時，它會導致癌癥、阿爾茨海默病和其他疾病。在對細胞應激、組織損傷或傳染性病原體產生的不同信號作出反應時，炎性體（inflammasome）觸發炎癥產生。白介素1（IL-1β）是一種炎性細胞因子或激素，是分泌蛋白，通常由巨噬細胞產生，在宿主抗病毒免疫應答過程中發揮關鍵作用。炎癥的有益影響和不利影響都是由IL-1β引發的。在正常情形下，IL-1β以非常低的數量產生，但是當對組織損傷、環境應激、感染或慢性炎癥作出反應時，IL-1β的產生高度地增加。IL-1β的分泌可以促進大量的急性蛋白表達，同時也參與機體局部的免疫調節作用，如促進B細胞的生長和分化以及抗體的形成；促進單核細胞的抗原遞呈能力等，以IL-1β通路為靶標的治療已成功地應用于許多病毒感染的臨床治療，如在治療干眼病的過程中，通過局部敷用靶向IL-1的拮抗劑藥物可顯著的降低干眼病的相關癥狀以及眼表疾病；臨床還可以通過抑制IL-1途徑治療痛風。IL-1β在病毒誘導應答過程中，機體受到病毒刺激應答，通過模式識別受體信號通路激活NF-κB信號通路，導致IL-1β前體的產生，此為信號1；同時病毒誘導炎癥小體活化，如NLRP3炎癥小體活化，活化過程包括NLRP3與ASC形成復合體，然后結合Caspase1的前體，并使其形成成熟的Caspase1，成熟的Caspase1對IL-1β前體進行切割，最終形成成熟的IL-1β并分泌至胞外，產生炎癥反應。

為了對抗宿主適度的免疫防御，病毒獲得了無數的策略，其中之一就是針對IL-1β產生的信號通路，包括抑制炎癥小體活化以及激活炎性小體使得其過度活化。例如，脊髓灰質炎病毒（EV71）的基因組能夠活化NLRP3誘導的IL-1β的分泌。寨卡病毒（Zika）的NS5作為非結構蛋白能夠通過結合NLRP3的LRRs和NACHT結構域激活NLRP3炎癥小體。EMCV的2B蛋白也參與激活NLRP3炎癥小體介導的IL-1β的分泌。許多病毒蛋白也同樣抑制NLRP3炎癥小體的活化，如流感病毒的NS1蛋白利用其N端結構抑制IL-1β以及IL-18的表達。麻疹病毒V蛋白結合NLRP3的C端，進而阻止NLRP3介導的IL-1β的分泌。EV71的2A和3C蛋白通過降解NLRP3抑制IL-1β的表達。

塞內卡病毒病是由A型塞內卡病毒引起的動物傳染病，主要感染豬，對不同年齡階段的豬都易感。在2015年初，巴西、泰國和中國首次暴發了由塞內卡病毒引起的水皰性疾病。同年，研究發現病毒感染與新生仔豬死亡率相關。SVA屬于RNA病毒科（Picornaviridae），SVA具有小RNA病毒基因組的典型特征，其基因組RNA由大約7200個核苷酸（nt）組成。該病毒基因組僅有一個開放閱讀框（open reading frames，ORF），編碼約2180個氨基酸的多聚蛋白。由先導蛋白（L）、P1（裂解VP1、VP2、VP3和VP4四種結構蛋白）、P2（裂解為2A、2B和2C三種非結構蛋白）、P3（裂解成3A、3B、3C和3D四種非結構蛋白）組成。3D蛋白是SVA的一個重要病毒蛋白，為病毒聚合酶。同時3D蛋白也參與結合宿主因子，但研究較少，如同科SVA的3D蛋白能夠與宿主因子相互作用如Sam68、DDX1等，其具體的機制不清楚，SVA 3D蛋白的參與免疫和炎癥反應的研究目前是空白。

發明內容