[發明專利]一種提高L-組氨酸產量的方法

有效

• 申請號: 202011639584.9
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112779198B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 劉龍;陳堅;王淼;呂雪芹;堵國成;李江華;劉延峰;李夢瑩
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/54;C12N9/12;C12N9/10;C12N15/70;C12N15/74;C12P13/24;C12R1/19;C12R1/43
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 王玉仙

1.一種提高L-組氨酸產量的方法，其特征在于，所述方法是在生產L-組氨酸的宿主菌中表達5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs和/或ATP轉磷酸核糖基酶編碼基因hisG，所述的5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，ATP轉磷酸核糖基酶編碼基因hisG的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生產L-組氨酸的宿主菌為腸桿菌科菌株。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的腸桿菌科菌株為大腸桿菌或粘質沙雷氏菌。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的大腸桿菌為E.coli BL21。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，表達5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs和/或ATP轉磷酸核糖基酶編碼基因hisG是通過質粒表達或基因組表達。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述的質粒表達，是將5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs或ATP轉磷酸核糖基酶編碼基因hisG連接到pET28a載體上進行表達；或者是將5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs和ATP轉磷酸核糖基酶編碼基因hisG同時連接到pETDuet載體上進行表達。

7.一種L-組氨酸產量提高的重組菌，其特征在于，所述的重組菌表達了5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs和/或ATP轉磷酸核糖基酶編碼基因hisG，所述的5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，ATP轉磷酸核糖基酶編碼基因hisG的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

8.根據權利要求7所述的重組菌，其特征在于，所述的重組菌是以大腸桿菌或粘質沙雷氏菌為宿主菌，以pET28a或pETDuet為載體。

9.一種權利要求7所述的重組菌發酵生產L-組氨酸的方法，其特征在于，是將所述的重組菌接種至發酵培養基中，在28～32℃進行培養。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述的發酵培養基為葡萄糖35～45g/L，酵母粉1～3g/L，(NH₄)₂SO₄ 14～18g/L，K₂HPO₄.3H₂O 0.5～0.7g/L，FeSO₄.7H₂O 0.004～0.006g/L，MnSO₄.5H₂O 0.004～0.006g/L，CaCO₃ 25～35g/L。