[發明專利]一種用于檢測豬圓環病毒4型的引物對、探針、試劑盒及其檢測方法在審
| 申請號： | 202011638345.1 | 申請日： | 2020-12-31 |
| 公開（公告）號： | CN112646931A | 公開（公告）日： | 2021-04-13 |
| 發明（設計）人： | 周遠成;駱輝;陰文奇;高露茜;李書偉;鄺聲耀 | 申請（專利權）人： | 四川省畜牧科學研究院;畜科生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都正華專利代理事務所(普通合伙) 51229 | 代理人： | 李蕊 |
| 地址： | 610000*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 檢測 圓環 病毒 引物 探針 試劑盒 及其 方法 | ||
1.一種用于檢測豬圓環病毒4型的引物對，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示的特異性引物。
2.根據權利要求1所述的用于檢測豬圓環病毒4型的引物對，其特征在于，采用所述引物對進行PCR檢測時，還需使用如SEQ ID NO.3所示的探針。
3.一種用于檢測豬圓環病毒4型的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1所述引物對以及權利要求2所述探針。
4.一種豬圓環病毒4型的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)提取待測樣本DNA；
(2)以步驟(1)所得DNA為模板，采用權利要求1所述引物和權利要求3所述探針對其進行PCR擴增，回收純化擴增產物后，根據檢測結果判斷是否含有豬圓環病毒4型。
5.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR反應體系為：2×Premix ExTaqTM 12μL、PCV4-F 1μL、PCV4-R 1μL、PCV4探針1μL、模板DNA2.0μL，最后用ddH2O補充至20μL。
6.根據權利要求5所述的檢測方法，其特征在于，所述PCV4-F、PCV4-R以及PCV4探針的濃度均為0.5μmol/L。
7.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR反應條件為：95℃預變性3min；95℃變性10s；60℃退火30s，共40個循環。
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