[發明專利]一種阿魏酸哌嗪有關物質的RT-HPLC檢測方法

有效

• 申請號: 202011636627.8
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN113075336B
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發明（設計）人: 何亞洲;王楓;朱麗君;魏偉業;吳小濤;趙卿;霍立茹;李戰
• 申請（專利權）人: 成都亨達藥業有限公司;南京濟群醫藥科技股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/60
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本發明涉及藥物分析技術領域，公開了一種阿魏酸哌嗪有關物質的RT?HPLC檢測方法，它包括：配置分析溶液；使用反相色譜柱，以酸或酸及羧酸鹽水溶液?有機相的混合液為流動相，采用梯度洗脫方法；將配置好的分析溶液上機測定。本發明分析方法能夠有效且準確的測定阿魏酸哌嗪中各種相關雜質，從而確保產品的質量可控。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，特別涉及一種阿魏酸哌嗪有關物質的反向高效液相色譜檢測方法。

背景技術

在藥物分析中所稱的“有關物質(related?substances)”是指在原料藥生產過程中帶入的起始原料、試劑、中間體、副產物和異構體等物質，也可能是制劑在生產、貯藏和運輸過程中產生的降解產物、聚合物或晶型轉變等特殊雜質。有關物質的種類與藥物的合成路線和制劑工藝密切相關，藥物在合成和制劑過程中的任何一個因素的改變都可能導致其有關物質的種類不同，因而有關物質的檢測和控制過程相對復雜。有關物質的檢測是控制藥品質量的重要指標。

阿魏酸哌嗪，化學名為3-甲氧基-4-羥基桂皮酸哌嗪，其結構式如下：

在臨床上，阿魏酸哌嗪對心血管疾病有較好的療效，能增加冠脈流量，改善心肌缺血，緩解血管痙攣，延長凝血時間及抗血小板凝集。阿魏酸哌嗪主要用于各種腎病的治療，如慢性腎炎、腎病綜合征和早期尿毒癥等。臨床療效表明，阿魏酸哌嗪可減少慢性腎小球疾病患者的尿蛋白，升高血漿蛋白，降低血尿素氮和肌酐水平，可降低全血黏度及血漿黏度，改善血液流變學，促進腎臟微循環，有助于提高機體的免疫功能，延緩腎臟疾病的發展。

阿魏酸哌嗪有關物質如下：雜質A、雜質B、雜質C、雜質D、雜質E、雜質F、雜質I、雜質J；其中雜質F為阿魏酸哌嗪的起始物料；雜質A是阿魏酸順式異構體，也是光降解雜質；雜質I為阿魏酸哌嗪高溫降解雜質；其他雜質均為工藝雜質，上述雜質結構見表1。

表1阿魏酸哌嗪各雜質名稱及結構

中國藥典已公開的關于阿魏酸哌嗪的藥品標準中采用薄層色譜法，靈敏度低，限度范圍寬松，而并未規定特定雜質；歐洲藥典、美國藥典和日本藥典均未收載阿魏酸哌嗪標準。

在文獻《HPLC法測定阿魏酸哌嗪的有關物質》中，采用乙酸水溶液-甲醇-乙腈三相梯度洗脫；檢測波長為286nm；其中研究了順式阿魏酸的檢測。該方法對儀器要求較高，需要四元液相進行梯度洗脫；特定雜質研究不過充分，僅對順式阿魏酸進行控制。

在文獻《阿魏酸哌嗪片的含量和有關物質的測定》中，采用1％乙酸溶液-甲醇(70:30)為流動相，等度洗脫，檢測波長為322nm。該方法的有點是，操作簡單，對儀器要求不高，方法不僅可以測定含量，也可以測定有關物質；缺點是該方法重在含量測定，并未對特定雜質進行研究，且檢測方法靈敏度不高。

在文獻《高效液相方法測定阿魏酸哌嗪片的含量》中，采用水-甲醇(60:40)為流動相，等度洗脫，檢測波長為310nm。該方法僅是含量測定方法，無法用以測定有關物質。

已經報道的阿魏酸哌嗪的分析方法未能對阿魏酸哌嗪合成工藝中產生的雜質和降解雜質進行充分的研究，均不能有效測定上述的包括順式異構體在內的8個特定雜質。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供一種阿魏酸哌嗪有關物質的RT-HPLC檢測方法，通過用十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，調整適當的洗脫梯度，解決了阿魏酸哌嗪特征峰與其異構體、高溫降解雜質和工藝雜質特征峰分離的問題，實現了對阿魏酸哌嗪原料藥質量的控制，且此方法靈敏度高，專屬性強，操作簡單。

本發明的阿魏酸哌嗪有關物質RT-HPLC的檢測方法，包括以下步驟：

a)配置分析溶液；

b)色譜條件；