[發明專利]用于檢測病原微生物的引物組

有效

• 申請號: 202011633514.2
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112725410B
• 公開（公告）日: 2023-02-28
• 發明（設計）人: 余成鵬;鄒樹勇;朱鵬遠;吳春求;陳丹;張東東;陳嘉昌;柳俊;胡朝暉
• 申請（專利權）人: 廣州市金圻睿生物科技有限責任公司
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12N15/11;C40B50/06;C12Q1/70;C12Q1/6895;C12Q1/689;C12Q1/04;C12Q1/14;C12Q1/10;C12R1/93;C12R1/72;C12R1/46;C12R1/45
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 林青中

1.引物組，其特征在于，所述引物組包含175對引物對；

所述175對引物對具有核苷酸序列如SEQ ID NO：1~175所示的上游引物，以及與上游引物依次對應的核苷酸序列如SEQ ID NO：176~350所示的下游引物。

2.試劑盒，其特征在于，包含權利要求1所述的引物組。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含如下試劑中的至少一種：

DNA聚合酶、dNTPs、裂解和/或洗滌緩沖劑、用于富集核酸的固相載體、核酸洗脫試劑、稀釋緩沖劑、水、分子量marker、蛋白酶K和中和試劑。

4.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括已知序列和濃度的待檢測核酸陽性對照。

5.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含末端修復酶、連接緩沖液、DNA連接酶以及接頭片段中的至少一種。

6.一種多種靶核酸的測序建庫方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

以待檢測物的基因組DNA為模板，使用權利要求1所述的引物組，或權利要求2~5任一項所述的試劑盒進行多重PCR擴增。

7.一種檢測多種病原微生物的非診斷目的方法，其特征在于，包括：

使用權利要求6所述的方法進行建庫，測序以判斷病原微生物的存在。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述測序的方法為高通量測序。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述病原微生物的種類包括98種。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述病原微生物包括：COVID-19、EB病毒、H1N12009、H3N2、H7N9、MERS冠狀病毒、SARS冠狀病毒、暗地嗜皮菌、白喉棒狀桿菌、白色念珠菌、百日咳鮑特菌、胞內分歧桿菌、鮑曼不動桿菌、鼻病毒A型、鼻病毒B型、鼻病毒C型、變異鏈球菌、表皮葡萄球菌、布魯菌、產氣腸桿菌、產酸克雷伯氏菌、產吲哚金黃桿菌、腸道病毒D68、大腸埃希菌、單核細胞增多性李斯特氏菌、地嗜皮菌、多瘤病毒、肺炎克雷伯菌、肺炎鏈球菌、肺炎衣原體、肺炎支原體、糞腸球菌、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、副流感病毒4型、蓋爾森基興奴卡氏菌、構巢曲霉、冠狀病毒229E、冠狀病毒HKU1、冠狀病毒NL63、冠狀病毒OC43、光滑念珠菌、龜分枝桿菌、赫倫荒原軍團菌、呼吸道合胞病毒A型、呼吸道合胞病毒B型、霍氏腸桿菌、雞鶉腸球菌、結核分枝桿菌、解糖腸球菌、金黃葡萄球菌、巨細胞病毒、卡他莫拉菌、柯薩奇病毒A16型、立克次氏體、淋病奈瑟菌、流感病毒A型、流感病毒B型、流感病毒C型、流感嗜血桿菌、流行性腮腺炎病毒、瘰疬分枝桿菌、麻疹病毒、摩根摩根菌、腦膜炎奈瑟球菌、釀膿鏈球菌、皰疹病毒1型、皰疹病毒2型、皰疹病毒6型、普通變形桿菌、鉛黃腸球菌、人博卡病毒1型、人博卡病毒2型、人博卡病毒3型、人博卡病毒4型、人腸道病毒71型、人偏肺病毒、溶血葡萄球菌、薩比亞病毒、屎腸球菌、嗜肺軍團菌、嗜麥芽窄食單胞菌、雙埃可病毒1型、雙埃可病毒2型、雙埃可病毒6型、斯氏普羅威登斯菌、銅綠假單胞菌、紋帶棒狀桿菌、無乳鏈球菌、腺病毒B組、腺病毒C組、腺病毒E組、星型奴卡菌、星座鏈球菌、煙曲霉、乙型腦炎和粘質沙雷氏菌。