[發明專利]針對新型冠狀病毒的疫苗以及其應用

在審

• 申請號: 202011632809.8
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112661865A
• 公開（公告）日: 2021-04-16
• 發明（設計）人: 接振旺;林高坤;林鈺庭
• 申請（專利權）人: 厚樸生物科技（蘇州）有限公司;深圳厚樸生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/02;A61K39/385;A61K39/215;A61K39/39;A61K47/68;A61P31/14
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

本發明提供了一種針對新型冠狀病毒的疫苗以及其應用。本發明首次揭示一種新的改造冠狀病毒刺突糖蛋白S1亞基以提高其免疫原性的方法，包括：將冠狀病毒刺突糖蛋白S1亞基與定點突變的IgG Fc連接；本發明也揭示了兩者融合后獲得的融合多肽以及以之與鋁佐劑混合后獲得的疫苗。本發明的融合多肽能夠被有效地表達，表達后能夠形成正確的蛋白空間結構，其與鋁佐劑混合而獲得的疫苗具有良好的免疫原性。

技術領域

本發明屬于生物技術以及病毒學領域，更具體地，本發明涉及針對新型冠狀病毒的疫苗以及其應用。

背景技術

2019新型冠狀病毒(2019-nCoV)引起的肺炎，臨床表現與病毒性肺炎極為相似；主要臨床表現為發熱、疲乏、干咳等，嚴重者可發生休克、膿毒血癥、呼吸衰竭而死亡。其具有隱蔽性和高傳染性，可導致一部分重癥或死亡病理。目前，該病毒引起的肺炎尚缺乏有效的藥物，為臨床診治和控制疫情帶來極大困難。除了導致人體的疾病，根據世衛組織最新的披露，全球有數以億計的人受到不同程度的精神健康問題影響，只有少數人能享受高質量的治療。

冠狀病毒粒子形狀并不規則，直徑約60-220nm。冠狀病毒的核酸為正鏈單鏈RNA，其特點是可以以自身為模板，指導合成病毒相關蛋白質。病毒進入宿主細胞后，首先以病毒RNA為模板表達出RNA聚合酶，隨后RNA聚合酶完成負鏈RNA的轉錄合成、各種結構蛋白mRNA的合成，以及病毒基因組RNA的復制。

冠狀病毒具有包膜結構，上面有三種蛋白：刺突糖蛋白(S，Spike Protein)、小包膜糖蛋白(E，Envelope Protein)和膜糖蛋白(M，Membrane Protein)，少數種類還有血凝素糖蛋白(HE蛋白，Haemaglutinin-esterase)。Spike蛋白在識別并結合宿主細胞表面受體，并介導病毒包膜與細胞膜融合的過程中起到關鍵性作用；M蛋白則參與了病毒包膜的形成與出芽過程；HE蛋白則是構成包膜的短凸起，可能與冠狀病毒早期吸附有關，某些冠狀病毒的HE蛋白可引起紅細胞的凝集以及對紅細胞的吸附。S蛋白位于病毒表面，形成棒狀結構；N蛋白包裹病毒基因組。

目前，人類仍缺乏有效的抗2019-nCoV的疫苗，在這種嚴峻的形勢下，盡快開發安全、有效的針對2019-nCoV的疫苗用以保護易感人群，對于保護人民健康與國家安全具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供針對新型冠狀病毒的疫苗以及其應用。

在本發明的第一方面，提供一種改造冠狀病毒刺突糖蛋白(Spike)S1亞基以提高其免疫原性(或免疫效果或免疫活性)的方法，包括：將冠狀病毒刺突糖蛋白S1亞基與定點突變的IgG Fc連接。

在本發明的第一方面，提供一種融合多肽，包含相互連接的以下的蛋白：冠狀病毒刺突糖蛋白S1亞基，以及定點突變的IgG Fc。

在一個優選例中，所述定點突變的IgG Fc的氨基酸序列如SEQ ID NO:1中第686～917位所示。

在另一優選例中，所述冠狀病毒刺突糖蛋白S1亞基的氨基酸序列如SEQ ID NO:1中第16～685位或第1～685位所示；或如SEQ ID NO:5中第16～685位或第1～685位所示。

在另一優選例中，其從氨基端到羧基端依次包含：冠狀病毒刺突糖蛋白S1亞基，定點突變的IgG Fc。

在另一優選例中，所述的冠狀病毒刺突糖蛋白S1亞基以及定點突變的IgG Fc之間，含有或不含有連接子。

在本發明的另一方面，提供一種核酸，所述的核酸編碼前面所述的融合多肽。

在本發明的另一方面，提供一種載體，所述的載體含有所述的核酸。

在本發明的另一方面，提供一種宿主細胞，所述的宿主細胞含有所述的載體或其基因組中整合有所述的核酸。