[發明專利]一種基于苯酚測定的地龍注射液檢測方法

有效

• 申請號: 202011631330.2
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112595793B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發明（設計）人: 苗瑞娟;張雷;陳華
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 深圳市精英專利事務所 44242
• 代理人: 李瑩

本發明提供了一種基于苯酚測定的地龍注射液檢測方法，采用液相色譜法將地龍注射液中的苯酚分離后在270nm處進行測定；采用的色譜柱固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠，洗脫方式為梯度洗脫；流動相包括流動相A和流動相B，其中，流動相A為20mM磷酸氫二銨，流動相B為40％乙腈。將苯酚從地龍注射液中分離后測定，檢測結果線性關系好，檢測精密度高、穩定性好、重復性好、耐用性好，操作簡便、穩定可靠。根據苯酚測定結果判斷地龍注射液中的苯酚添加量是否符合產品標準，進而可以有效地控制地龍注射液的成品質量，保證用藥安全。

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，尤其是指一種基于苯酚測定的地龍注射液檢測方法。

背景技術

地龍注射液含有核苷、氨基酸、蛋白質及多肽、脂類、酶類及微量元素等多種成分，具有平喘止咳、降壓等功效，可用于支氣管哮喘所致的咳嗽、喘息等。苯酚作為抑菌劑加入。

次黃嘌呤和含氮化合物是地龍注射液平喘止咳的主要活性成分，現行質量標準含量測定部分僅包括氮測定法測總氮量、滴定法測氨基氮以及薄層色譜法測纈氨酸含量。

苯酚作為抑菌劑，有一定的毒性和腐蝕性，現行質量標準沒有對苯酚進行檢查和含量測定，《中國藥典》2020年版四部中苯酚的測定方法是氧化還原滴定法，而且是回滴法，存在實驗操作繁瑣、苯酚易氧化、干擾因素多等弊端。潘云志在《醫藥導報》2013年第32卷第4期的“反相高效液相色譜法測定地龍注射液中苯酚含量”公開了一種測定地龍注射液中苯酚含量的方法，該法以甲醇-水(60:40)為流動相，雖然苯酚在濃度范圍內線性關系良好，平均回收率99.46％，RSD＝0.25％(n＝9)，但該條件下核苷類成分無法完全分離，結果可靠性低。

為了有效控制地龍注射液成品質量，減少用藥安全隱患，新方法應當能夠在測定有效成分的同時，還檢測苯酚的含量，為地龍注射液質量綜合控制提供了可靠的實驗依據。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：將苯酚從地龍注射液中分離后測定，進而控制地龍注射液的質量。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：

一種基于苯酚測定的地龍注射液檢測方法，采用液相色譜法將地龍注射液中的苯酚分離后在270nm處進行測定；采用的色譜柱固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠，洗脫方式為梯度洗脫；流動相包括流動相A和流動相B，其中，流動相A為20mM磷酸氫二銨，流動相B為40％乙腈；根據苯酚含量測定結果監控地龍注射液的質量。

進一步地，所述液相色譜法還同時將地龍注射液中的次黃嘌呤、尿苷、肌苷和鳥苷分別分離，所述次黃嘌呤、尿苷、肌苷和鳥苷均在248nm處進行測定；還分別根據次黃嘌呤、尿苷、肌苷和鳥苷的含量測定結果監控地龍注射液的質量。

進一步地，所述梯度洗脫的洗脫程序為：

0min，流動相A的體積分數為100％，流動相B的體積分數為0；

15min，流動相A的體積分數為100％，流動相B的體積分數為0；

30min，流動相A的體積分數為90％，流動相B的體積分數為10％；

31min，流動相A的體積分數為20％，流動相B的體積分數為80％；

45min，流動相A的體積分數為5％，流動相B的體積分數為95％；

46min，流動相A的體積分數為100％，流動相B的體積分數為0；

60min，流動相A的體積分數為100％，流動相B的體積分數為0；

流速為1.0mL·min^-1。

進一步地，所述液相色譜法中，樣品處理時采用的溶劑為20mM磷酸氫二銨。