[發(fā)明專利]飛蝗Rab11A基因及其dsRNA在飛蝗防治中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011630622.4
• 申請(qǐng)日: 2020-12-31
• 公開（公告）號(hào): CN112662689B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李濤;史學(xué)凱;王艷麗;范云鶴;張建珍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/55
• 分類號(hào): C12N15/55;C12N15/10;C12N15/113;C12N15/11;A01N57/16;A01P7/04
• 代理公司: 太原申立德知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 14115
• 代理人: 郭海燕

1.一種飛蝗Rab11A基因，其特征在于：所述飛蝗Rab11A基因全長的核苷酸序列如SEQID NO：1所示。

2.一種權(quán)利要求1所述的飛蝗Rab11A基因的獲得方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟1，基于飛蝗轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫，采用生物信息學(xué)方法搜索飛蝗Rab11A基因的序列；

步驟2，根據(jù)步驟1獲得的序列，設(shè)計(jì)并合成其上、下游引物；

步驟3，提取飛蝗3齡若蟲總RNA，采用M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶將所提RNA反轉(zhuǎn)錄成第一鏈cDNA，獲得PCR擴(kuò)增反應(yīng)所需模板；

步驟4，利用步驟2的引物和步驟3的模板，通過PCR擴(kuò)增反應(yīng)獲得飛蝗Rab11A基因。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種飛蝗Rab11A基因的獲得方法，其特征在于，所述步驟2中上、下游引物的核苷酸序列分別如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。

4.一種基于權(quán)利要求1所述的飛蝗Rab11A基因合成的dsRNA，其特征在于：所述dsRNA其中一條鏈的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

5.一種用于合成權(quán)利要求4所述的dsRNA的引物對(duì)，其特征在于，包括上游引物和下游引物，均含有T7啟動(dòng)子，上游引物和下游引物的核苷酸序列分別如SEQ ID NO：5和SEQ IDNO：6所示。

6.一種權(quán)利要求4所述的dsRNA的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：根據(jù)飛蝗Rab11A基因設(shè)計(jì)用于合成其dsRNA的上、下游引物，引物序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示，以LmRab11A全長質(zhì)粒作為模板，PCR擴(kuò)增后，擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)試劑盒純化，按照試劑盒說明書體外轉(zhuǎn)錄合成dsRNA。

7.一種權(quán)利要求4所述的dsRNA在飛蝗防治中的應(yīng)用。