[發明專利]一種金胺O染色液及其制備方法

在審

• 申請號: 202011630179.0
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112595569A
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發明（設計）人: 劉炳憲;謝菊元;王焱輝;王克惠;楊通
• 申請（專利權）人: 寧波江豐生物信息技術有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 俞滌炯

本發明公開了一種金胺O染色液及其制備方法，該金胺O染色液，由初染液、脫色劑和復染液組成；其中，初染液包括如下重量百分比的組分：苯酚6.50％?9.50％、金胺O 0.10％?0.40％、異丙醇16.50％?19.0％、甘油10.5％?12.0％、余量為純水；脫色劑包括如下體積百分比的組分：濃鹽酸4.50％?6.50％、余量為95％乙醇；復染液包括如下重量百分比的組分：高錳酸鉀0.40％?1.0％、余量為純水。本發明的金胺O染色液每250毫升染液可染色500張左右的切片；并且染色效果好，經藍色光源照射激發，在高錳酸鉀復染的暗色背景下呈現明亮的黃綠色熒光，桿狀略彎曲。本發明的金胺O染色液制備方法，在配制過程中限定溶解順序，有效提高試劑與溶劑的充分混勻程度，適用于規模化生產，得到的金胺O染色液保存期最長可達24個月。

技術領域

本發明涉及細菌染色技術領域，尤其涉及一種金胺O染色液及其制備方法。

背景技術

近年來結核病的發病率呈上升趨勢，臨床上結核病的診斷主要依靠病理組織學結果及抗酸染色法加以確診。抗酸染色法是一種特異性高且長期用于結核病病原學診斷的經典方法，高質量的痰涂片抗酸染色鏡檢對傳染性肺結核的診斷比X線的準確性高；技術相對簡單，容易標準化和完成操作；建立AFB檢查時所需設備投入少；檢查成本低，易于接受；從收到標本到報告結果的時間段，能夠滿足臨床診斷的需要；對涂陽患者的治療效果，能夠做出及時和準確的評價。但傳統的萋-尼抗酸染色其鏡檢時間較長，敏感性低，無法滿足目前臨床診斷的需求。

發明內容

本發明的目的是針對現有萋-尼抗酸染色其鏡檢時間較長、敏感性低、無法滿足目前臨床診斷需求的問題，提供一種金胺O染色液及其制備方法。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案是：

本發明的第一方面是提供一種金胺O染色液，由初染液、脫色劑和復染液組成；

其中，所述初染液包括如下重量百分比的組分：苯酚6.50％-9.50％、金胺O0.10％-0.40％、異丙醇16.50％-19.0％、甘油10.5％-12.0％、余量為純水；

所述脫色劑包括如下體積百分比的組分：濃鹽酸4.50％-6.50％、余量為95％乙醇；

所述復染液包括如下重量百分比的組分：高錳酸鉀0.40％-1.0％、余量為純水。

本發明的第二發明是提供一種金胺O染色液的制備方法，所述初染液的配制方法，包括如下步驟：金胺O與異丙醇混合并攪拌直至充分溶解，得到試劑甲；苯酚與所述試劑甲混合并攪拌直至充分溶解，得到試劑乙；甘油與所述試劑乙混合并攪拌直至充分混勻，得到試劑丙；所述試劑丙與剩余百分比的純水混合并攪拌直至充分混勻，得所述初染液；

所述脫色劑的配制方法，包括如下步驟：無水乙醇與純水混合并攪拌直至充分混勻，得95％乙醇；將濃鹽酸沿著瓶壁緩慢倒入所述95％乙醇中，得所述脫色劑；

所述復染液的配制方法，包括如下步驟：高錳酸鉀與純水混合并攪拌直至充分溶解，得所述復染液。

進一步地，所述初染液的配制方法中，所述金胺O與異丙醇的質量比為1:(41-190)；所述苯酚與試劑甲的質量比為1:(1.7-3)。

進一步優選地，所述初染液的配制方法中，所述金胺O與異丙醇的質量比為1:70、1:80、1:90或1:100；所述苯酚與試劑甲的質量比為1:1.8、1:2、1:2.2、1:2.4或1:2.6。

進一步地，所述初染液的配制方法中，所述甘油與試劑乙的質量比為1:(1.9-2.8)。

進一步優選地，所述初染液的配制方法中，所述甘油與試劑乙的質量比為1:2、1:2.2、1:2.4或1:2.6。

進一步地，所述脫色劑的配制方法中，所述濃鹽酸與95％乙醇的體積比為1:(14-21)。