[發明專利]cBIN1抗體及其應用

有效

• 申請號: 202011626540.2
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112794900B
• 公開（公告）日: 2022-10-25
• 發明（設計）人: 周楊釗;周康
• 申請（專利權）人: 中南大學湘雅二醫院
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C12N15/13;G01N33/68
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿

本發明涉及免疫技術領域，尤其涉及cBIN1抗體及其應用。本發明提供的cBIN1抗體的重鏈的三個CDR區分別具有如SEQ ID NO:1、2和3所示的氨基酸序列；輕鏈的三個CDR區分別具有如SEQ ID NO:4、5和6所示的氨基酸序列。該抗體與抗原具有良好的結合能力，以其制備試劑能夠實現對目標抗原的準確檢測。

技術領域

本發明涉及免疫技術領域，尤其涉及cBIN1抗體及其應用。

背景技術

心衰是多種原因導致的心臟結構和/或功能的異常改變，使心室收縮和/或舒張功能發生障礙，從而引起的一組復雜的臨床綜合征。心衰是各種心臟疾病的嚴重表現或晚期階段，死亡率和再住院率居高不下。近幾年各地的資料顯示，我國心衰的患病率已顯著增加至2％～3％，現癥患者約1000萬。

心衰心肌的核心病理改變是鈣離子傳輸能力變弱，使心肌的收縮能力受限制。而導致心衰特征性的鈣離子傳輸障礙的原因是興奮-收縮(excitation-contraction)(E-C)失耦聯與非同步的鈣釋放。生理條件下，膜電位去極化后誘發同步的鈣釋放，使鈣離子穿過細胞膜，在肌漿網內觸發更多的鈣釋放，即鈣誘導的鈣釋放calcium-induced-calcium-release(CICR)過程。健康的和理想狀態下的CICR過程依賴于位于心肌細胞之間結合部肌漿網膜上的蘭尼堿受體(ryanodine receptors，RyRs)和橫管(transverse-tubule，T-tubule)膜上的L型鈣離子通道(L-type calcium channels，LTCCs)之間的緊密協作。橫管內的LTCCs與結合部肌漿網膜上的RyRs形成了影響細胞漿外鈣離子轉運的二聚體復合物。心肌受各種原因導致的壓力負荷增加而導致的病理性肥厚過程中，大量的橫管結構發生錯亂和重構，同時也伴隨著這些二聚體結構的破壞，并最終導致非同步的CICR過程，并逐漸由肥厚失代償發展為心衰。心衰時，除了橫管的形態學上的一系列重構改變，受損的LTCC轉移到橫管，與RyRs形成二元復合體的過程也被擾亂，Ga²⁺轉移能力下降，進而導致E-C失耦聯與心臟功能下降。

BIN蛋白(Bar蛋白編碼基因)可分為AmphiphysinI、AmpII(又稱Bin1)、Bin2、Bin3四種蛋白。作為含有BAR域的蛋白質超家族，Bin1包含一個特征由外顯子1～9編碼的N端條域(N-BAR)。有趣的是，Bin1的帶有20個外顯子的基因根據不同的拼接方案生成不同的Bin1蛋白而具有不同的細胞功能。心肌橫管內心臟橋接整合因子1(cardiac bridgingintegrator 1，cBIN1)就是帶有13，17兩個外顯子的BIN1蛋白亞型。

研究表明，cBIN1參與形成的橫管微結構域具有促進和維持LTCC-RyR二元復合體形成的功能。現有的研究結果表明，擁有cBin1的微結構域可以通過以下4項機制促進有效的LTCC-RyR二元復合體的形成：1)促進LTCCs通過微結構域向前轉運；2)促進已經轉移到橫管的LTCCs聚集成簇；3)在橫管腔內形成保護性的細胞外鈣離子的慢速彌散區，以控制LTCCs的轉移動力；4)將胞漿內的RyRs重新召集會交界區肌漿網膜上，便于與LTCCs形成新的二元復合體。同時，cBin1微結構域通過續膜翻轉和急性應激刺激下快速重組的能力，對維持心肌橫管的穩態發揮了作用。與此同時，研究發現，在心衰相關刺激刺激下，cBin1微結構域會因為cBin1的轉錄減少而丟失，并伴隨著二元復合體形成的減少和心肌收縮力的損傷。也就是說，當cBin1表達減少減少時，橫管的微結構域結構會發生紊亂，進而降低心臟收縮能力和對β受體的反應。

因此，cBIN1有望成為一種新型的心衰標記物。如果能夠有效的檢測心肌或血液內cBIN1的表達水平，可以客觀的評價心臟結構完整性和功能狀態，為心衰的評估，治療提供客觀可靠的依據，指導心衰的治療。開發檢測cBIN1的敏感抗體將有效促進對該標記物的檢測和評估，為臨床診斷和治療心衰提供新的可靠的參考。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供cBIN1抗體及其應用。