[發明專利]一種利用超濾和納濾的技術制備高純度NMN的方法

在審

• 申請號: 202011625878.6
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112851720A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 余建軍;徐欽源
• 申請（專利權）人: 音芙醫藥科技（上海）有限公司
• 主分類號: C07H1/06
• 分類號: C07H1/06;C07H19/048;B01D61/58
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• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種利用超濾和納濾的技術制備高純度NMN的方法，該方法通過選用合適的超濾膜和納濾膜能成功實現酶催化NMN和化學合成NMN的有效分離，高產率獲得高純度的NMN產品。對于酶催化制備的NMN，先過濾回收固定化酶催化劑。然后用超濾膜除去體系中的大分子化合物如ATP，ADP。用納濾膜除去小分子的化合物如煙酰胺，核糖等；最后，經濃縮析晶制得高純NMN。對于化學合成方法制備的NMN，反應淬滅中和后先用納濾膜除去反應中的鹽和煙酰胺，核糖，溶劑殘留。然后用超濾膜除去大分子雜質，如雙磷酸化雜質，三磷酸化雜質。最后經納濾濃縮后析晶制得高純度NMN。

技術領域

本發明涉及合成工程劑領域，具體為一種利用超濾和納濾的技術制備高純度NMN的方法。

背景技術

煙酰胺單核苷酸(Nicotinamide mononucleotide，簡稱NMN)是一種人體內重要的物質，同時在一些水果和蔬菜中也有發現。NMN有2種不規則存在形式，α和β；β異構體是NMN的活性形式，分子量為334.221g/mol。因煙酰胺屬于維生素B3，因此NMN屬于維生素B族衍生物范疇，其廣泛參與人體多項生化反應，與免疫、代謝息息相關。在人體中NMN是NAD+最直接的前體，其功能是通過NAD+體現。NAD+又叫輔酶Ⅰ，全稱煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，存在于每一個細胞中，參與了上千項反應。在多種細胞代謝反應中，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）分子都扮演著重要角色，是細胞保持活力的重要支撐。近年來隨著關于NMN的各種功效研究的不斷深入，市場對于NMN的追捧也是與日俱增。這同時也對高純度NMN的制備提出了更加迫切的需求。

目前，β-煙酰胺單核苷酸的合成方法主要包括兩種途徑，即酶催化合成和有機化學合成。 酶催化合成β-煙酰胺單核苷酸時，以煙酰胺、三磷酸腺苷和D-核糖作為底物，在核糖激酶 (RK)和煙酰胺核糖磷酸轉移酶(NAMPT)作為催化劑的作用下催化制備β-煙酰胺單核苷酸。這種方法所用的酶的價格較高，而且來源有限，因此采用該方法制備β-煙酰胺單核苷酸時，產能較低，生產成本較高。化學合成一般用β-煙酰胺核苷和磷酸化試劑反應生成NMN，再經樹脂柱洗脫得到β-煙酰胺單核苷酸水溶液產品。但是由于NMN在堿性水溶液中穩定性較差，所以產品收率較低，純度也不高。基于NMN的反應液體系中含有化合物雜質的分子量，電性差別比較大的特點，本發明采用了選擇合適的納濾和超濾體系，能對酶催化和化學合成的NMN反應液以實現精準的提純分離。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的缺陷，提供一種利用超濾和納濾的技術制備高純度NMN的方法，以解決上述背景技術提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種利用超濾和納濾的技術制備高純度NMN的方法，具體步驟如下：

S1：先對酶法和合成法的反應液做一定的預處理；

S11:對于酶法的反應液需先通過過濾方法除去固定化酶催化劑；

S12:對于合成法反應液需要先加水淬滅反應體系，并用有機溶劑萃取除去反應溶劑磷酸三乙酯，加入合適的堿液調節pH值至4左右；

S2：采用適合孔徑的超濾和納濾膜對反應體系中的雜質進行精確分離。

作為本發明的一種優選技術方案，所述S2中所使用的納濾膜的規格為200-800道爾頓，所使用的超濾膜為1000-5000道爾頓。

作為本發明的一種優選技術方案，所述S1中酶的反應液，需先用超濾膜除去三磷酸腺苷和二磷酸腺苷，再用納濾膜除去各種鹽和核糖，煙酰胺；合成法反應液，需要先用納濾膜除去反應液中殘留的溶劑和中和所產生的鹽如氯化鈉，磷酸二氫鈉，以及煙酰胺，核糖和原料煙酰胺核苷。

作為本發明的一種優選技術方案，所述S2中對于進行超濾或者納濾的樣品水溶液固含量控制在5-10%。

作為本發明的一種優選技術方案，所述S2中對于超濾膜所使用增壓泵的壓力不能超過0.8MPa。