[發明專利]一種利用脂肪酶修復鄰苯二甲酸酯污染土壤的方法

有效

• 申請號: 202011624793.6
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112845566B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 孫建強;張安平;鄭嚴
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: B09C1/08
• 分類號: B09C1/08
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

1.一種修復鄰苯二甲酸酯污染土壤的方法，其特征在于所述方法為：將脂肪酶加入鄰苯二甲酸酯污染土壤中，調節土壤pH5.5-8.5、質量含水量15-45％，20-50℃條件下恒溫培養，降解土壤中鄰苯二甲酸酯；所述鄰苯二甲酸酯為鄰苯二甲酸二乙酯、鄰苯二甲酸二異丁酯或鄰苯二甲酸二正丁酯中的一種；所述脂肪酶為源自假絲酵母菌(Candida sp.)的脂肪酶EC3.1.1.3；所述脂肪酶加入量為0.5-10U/g土壤；

所述脂肪酶為固定化脂肪酶，所述固定化脂肪酶按如下方法制備：將脂肪酶加入pH為6-8的磷酸鹽緩沖液中制成脂肪酶溶液，再加入生物炭，攪拌均勻，在溫度為30-50℃，轉速為100-200rpm的恒溫振蕩培養箱中固定反應1-9h，抽濾，濾餅干燥，獲得固定化脂肪酶；

所述生物炭是以玉米秸稈為原料，首先經過多次去離子水沖洗以去除表面黏附物及灰塵，隨后在通風處初步風干，將風干后的玉米秸稈于70-80℃過夜干燥、粉碎，獲得玉米秸稈粉末；將玉米秸稈粉末在600℃的馬弗爐中炭化6h，冷卻至室溫后取出，獲得生物炭；

所述生物炭為活化后的生物炭，所述活化后的生物炭按如下方法制備：將生物炭研磨，過20-80目篩，得到生物炭粉；將生物炭粉加入質量濃度5％NaOH水溶液中，在室溫環境下150rpm磁力攪拌2h，真空抽濾，濾餅在80℃環境下烘干24h；將烘干后的生物炭在氮氣流中，以10℃/min的速率升溫至600℃并保溫2h，去離子水清洗后用0.1M的HCl水溶液洗滌至中性進行中和，最后用去離子水清洗至中性并在60℃烘箱內烘干，得到活化后的生物炭；所述NaOH水溶液體積用量以生物炭粉重量計為10mL/g。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述鄰苯二甲酸酯污染土壤中各種鄰苯二甲酸酯污染濃度均為0.1-10mg/kg。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述土壤pH首先用質量濃度30％醋酸水溶液和質量濃度10％氧化鈣水溶液將PAEs污染的土壤粗調至7.5，然后用100mM磷酸鹽緩沖液準確調節pH值為7.5。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述脂肪酶溶液濃度為1-6U/mL，所述脂肪酶溶液體積用量以生物炭重量計為10mL/g。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述氮氣流的流速為200mL/min。