[發明專利]一種通用的細菌疫苗的制備方法和應用

有效

• 申請號: 202011623218.4
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112755180B
• 公開（公告）日: 2022-01-28
• 發明（設計）人: 黃惟巍;馬雁冰;李維冉;楊忠倩;華良群;張啟書;龍瓊;白紅妹;楊旭;孫文佳
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院醫學生物學研究所
• 主分類號: A61K39/085
• 分類號: A61K39/085;A61K39/104;A61K39/108;A61K39/39;A61K47/46;A61P31/04;A61P37/04;C12N1/20
• 代理公司: 北京國林貿知識產權代理有限公司 11001
• 代理人: 鄭俊彥;許文娟

1.一種細菌疫苗的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

步驟1，在培養基中培養細菌，當OD600達到1.0時，將培養基離心，去除上清，細菌沉淀經洗滌后重懸，得到細菌懸浮液；

步驟2，高壓均質處理：對得到的細菌懸浮液進行高壓均質處理，得到的懸浮液經離心，收獲上清液，上清液再經超速離心，去除上清收集沉淀，沉淀經重懸得到囊泡懸浮液；

所述高壓均質處理時，細菌在超高壓強的驅動下被擠過夾縫形成人工水泡，并組裝為完整的細菌生物膜囊泡；所述高壓均質處理的壓力范圍在1200bar~2000bar；

步驟3，對所述囊泡懸浮液進行柱層析純化或密度梯度離心純化，獲得純化后的細菌生物膜囊泡BBV，即為所述細菌疫苗。

2.根據權利要求1所述細菌疫苗的制備方法，其特征在于，所述細菌包括耐藥細菌和敏感細菌，所述耐藥細菌包括碳青霉烯耐藥的肺炎克雷伯菌、碳青霉烯耐藥的鮑曼不動桿菌、碳青霉烯耐藥的銅綠假單胞菌、碳青霉烯耐藥的大腸桿菌、甲氧西林耐藥的金黃色葡萄球菌、萬古霉素耐藥的糞腸球菌；所述敏感細菌包括肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌、干燥奈瑟菌、溶血性葡萄球菌、腦膜炎球菌、雙歧桿菌、卡他奈瑟菌、溶血性鏈球菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌、莫拉氏菌、艾肯氏菌、流感嗜血桿菌。

3.根據權利要求1或2所述細菌疫苗的制備方法，其特征在于，步驟1中在進行離心前，將C₁₀H₁₄N₂Na₂O₈（EDTA·2Na）緩慢加入培養基中，振蕩條件下孵育后再進行離心處理。

4.一種細菌疫苗，其特征在于，所述疫苗由權利要求1~3任一項所述制備方法制備得到。

5.權利要求4所述細菌疫苗，其特征在于，所述疫苗的應用方式包括皮下注射、肌肉注射、吸入及口服。

6.如權利要求4所述細菌疫苗作為其他疫苗載體的用途，所述其他疫苗包括肽疫苗、亞單位疫苗、DNA疫苗、RNA疫苗。