[發明專利]用于人生長激素檢測的組合物及應用和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法

在審

• 申請號: 202011622960.3
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112816713A
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 秦軍;謝元東;謝良思;侯雪恬;周璟
• 申請（專利權）人: 北京聯眾泰克科技有限公司;江蘇優尼泰克生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/532;G01N21/76
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

本發明涉及電化學檢測領域，特別涉及用于人生長激素(hGH)檢測的組合物及應用和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法。本發明采用方法為電化學發光法，采用吡啶釕作為化學發光標記物具有明顯優勢，主要表現在：靈敏度更好，穩定性更好，釕是金屬離子，分子量小，不影響抗體的空間位阻。生產過程短，重復性好，檢測范圍寬。電化學發光反應可控，降低信號采集難度。

技術領域

本發明涉及電化學檢測領域，特別涉及用于人生長激素(hGH)檢測的組合物，該組合物的應用，包含該組合物的磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒，以及基于該組合物或試劑盒的磁微球電化學發光免疫檢測方法。

背景技術

hGH是人生長激素(human Growth Hormone)，是垂體分泌量最大的激素。它在幼年和青春期可促進身體長高，并能以促進生長的方式終生影響主要代謝過程。hGH的分泌由分別促進和抑制其釋放的下丘腦生長激素釋放激素(GH-RH)和生長激素抑制素而進行控制。在正常人群中，hGH是短暫分泌(脈沖式分泌)，它受到包括緊張度、體育運動和睡眠在內的多種因素的調節。

hGH沒有特異性的靶器官，但已證實其受體在人肝細胞和循環中的淋巴細胞上。hGH的代謝作用一般可分為兩個主要類別：(a)直接的抗胰島素作用(脂解和引起高血糖)；(b)胰島素樣間接作用(抗脂解和促有絲分裂)。后者的作用是引起身高增長，這是hGH的典型作用。這可通過生長調節素而施加作用；生長調節素是分子量相對較低的激素(分子量7kDa)，其化學結構與胰島素原非常相似。

該測試有助于正確診斷機體的生長病變，即：

－激素缺乏，包括青春期延遲和青春期身材矮小。

－激素過多，與幼兒或青少年的巨人癥或者成人的肢端肥大癥有關。

－此外，該測試項目可能有助于對生長激素替代療法進行評價。

本發明采用方法為電化學發光法，采用三聯吡啶釕作為化學發光標記物具有明顯優勢，主要表現在：靈敏度更好，穩定性更好，釕是金屬離子，分子量小，不影響抗體的空間位阻。生產過程短，檢測范圍寬，重復性好。電化學發光反應可控，降低信號采集難度。

發明內容

本發明提供了一種用于人生長激素(hGH)檢測的組合物及應用和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法，具有生產效率高、檢測時間短、適用于全自動檢測，具有更高的靈敏度、線性范圍寬等優點。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了用于人生長激素(hGH)檢測的組合物，包括hGH試劑Ra、hGH試劑Rb、鏈霉親和素超順磁微球；

所述hGH試劑Ra包括含生物素標記的抗hGH單克隆抗體；

所述hGH試劑Rb包括含三聯吡啶釕標記的抗hGH單克隆抗體；

所述鏈霉親和素超順磁微球包括表面包裹帶有鏈霉親和素的超順磁微球。

在本發明的一些具體實施方案中，所述超順磁微球的粒徑在1.5～5.0μm。

在本發明的一些具體實施方案中，所述hGH試劑Ra中，每個抗體分子表面的生物素分子標記量為2～5個；所述hGH試劑Rb中，每個抗體分子表面的釕分子標記量為2～10個。

在本發明的一些具體實施方案中，所述hGH試劑Ra的制備方法為：在緩沖液存在的條件下，取抗hGH單克隆抗體與生物素混合，制得所述hGH試劑Ra；所述緩沖液包括pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的磷酸鹽緩沖液或pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的三羥甲基氨基甲烷緩沖液。