[發明專利]一種提高乙酰氨基葡萄糖發酵單位的方法

在審

• 申請號: 202011618902.3
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112608959A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 謝沛;李靜;張兆坤
• 申請（專利權）人: 河南巨龍生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26;C12N1/38;C12N1/20;C12R1/19
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 時亞娟

1.一種提高乙酰氨基葡萄糖發酵單位的方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一、大腸桿菌原始菌株經斜面活化，生化培養箱37℃培養20h，再經梯度稀釋，涂布于完全培養基上，挑取單個菌落分別接種到斜面上，生化培養箱30~36℃培養12h，得到活化菌種；

步驟二、種子培養：將步驟一所得活化菌種接種到裝有種子培養基的種子瓶中，培養條件：溫度30~36℃、搖床轉速200rmp、培養時間6~8 h，得種子液；

步驟三、將步驟二所得種子液接種到裝有發酵培養基的發酵瓶中，所述發酵培養基的體積為x L；接種量：5-15%，培養條件：初始發酵溫度30-36℃，空氣流量5~50L/min和攪拌速度200~800r/min使溶氧維持在10~40%，發酵pH值控制在6.0~7.2之間；當菌體OD為10~15時，添加x mL濃度為0.1 mol/L 的IPTG誘導，繼續培養到菌種OD值生長到50~80時，再一次性添加x mL濃度為0.1 mol/L的IPTG、10x mL濃度為5g/L的葡萄糖酸鈣溶液和x mL濃度為0.5g/L的碘化鉀溶液，繼續培養10~20h結束。

2.根據權利要求1所述的一種提高乙酰氨基葡萄糖發酵單位的方法，其特征在于：步驟二所述種子培養基中所含的組分及其含量分別為：葡萄糖20~30g/L，K₂HPO₄10~20g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5~3.0g/L，KH₂PO₄ 10~20g/L，檸檬酸0.5~3.0g/L，(NH₄)₂SO₄ 5~10.0g/L和微量元素5~10.0mL/L。

3.根據權利要求1所述的一種提高乙酰氨基葡萄糖發酵單位的方法，其特征在于：步驟三所述發酵培養基中所含的組分及其含量分別為：葡萄糖20~30g/L，K₂HPO₄3.0~10.0g/L,MgSO₄·7H₂O 0.5~3.0g/L， 檸檬酸1.0~7.0.0g/L，(NH₄)₂SO₄ 5~10.0g/L和微量元素5~10.0mL/L。

4.根據權利要求1所述的一種提高乙酰氨基葡萄糖發酵單位的方法，其特征在于：步驟三所述接種量為7%。