[發明專利]一種二維液相色譜純化植物多糖的方法及裝置

在審

• 申請號: 202011612223.5
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112611825A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 魯洪峰
• 申請（專利權）人: 常州博世偉業生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種二維液相色譜純化植物多糖的裝置，其特征在于，是一種在線二維液相制備系統，包括：第一切換閥，第二切換閥，第三切換閥，第一色譜柱，第二色譜柱，第一捕集柱，第二捕集柱，第一液泵，第二液泵，第一檢測器，第二檢測器，分流器，廢液池和餾分收集器；

所述第一切換閥，第二切換閥，第三切換閥均分別為兩位六通閥；所述第一液泵的出口端通過管路連接第一色譜柱的進口端，所述第一色譜柱的出口端通過管路連接第一檢測器的進口端，所述第一檢測器的出口端通過管路連接第一切換閥的1號位，所述第一切換閥的2號位通過管路與所述廢液池連接，所述第一切換閥的6號位通過管路與所述第二切換閥的1號位連接；

所述第二切換閥的1號位通過管路與所述第一切換閥的6號位連接，2號位通過管路與所述第一捕集柱的進口端連接，6號位通過管路與所述第二捕集柱的進口端連接，3號位通過管路與所述第二切換閥的5號位連接，4號位堵死，5號位通過管路與所述第二色譜柱的進口端連接，所述第二色譜柱的出口端通過管路連接分流器的1號入口位，所述分流器的2號出口位通過管路連接第二檢測器的進口端，所述分流器的3號出口位通過管路連接到餾分收集器，餾分收集器與所述廢液池連接；

所述第三切換閥的6號位通過管路與所述廢液池連接，1號位通過管路與所述第二捕集柱的出口端連接，2號位通過管路與所述第二液泵的出口端連接，3號位堵死，4號位通過管路與所述第三切換閥的2號位連接，5號位通過管路與所述第一捕集柱的出口端連接。

2.如權利要求1所述的裝置，其特征是，所述第一色譜柱、第二色譜柱的基質材料分別為硅膠，葡聚糖，瓊脂糖或聚甲基丙烯酸甲酯中的任意一種或二種以上。

3.如權利要求1或2所述的裝置，其特征是，所述第一色譜柱為體積排阻色譜柱；所述第二色譜柱是氨基色譜柱、C18色譜柱、C8色譜柱、C4色譜柱、HILIC色譜柱中的任意一種。

4.如權利要求1所述的裝置，其特征在于，所述第一檢測器為示差檢測器；所述第二檢測器為蒸發光散射檢測器。

5.如權利要求1所述的裝置，其特征是，所述第一色譜柱、第二色譜柱和捕集柱分別是玻璃柱、不銹鋼柱、樹脂柱中的任意一種或二種以上，其直徑為20-800mm；裝填的填料其粒徑為50um-200um；運行壓力在0.2-20Mpa。

6.如權利要求1所述的裝置，其特征是，所述第一色譜柱流動相是純水溶液，可以添加有機溶劑中的甲醇和/或乙醇，降低流動相極性，提供特殊的選擇性，洗脫體積為柱體積的1倍到20倍體積之間；所述第二色譜柱弱洗脫能力的流動相是水，強洗脫能力的流動相是有機試劑中的甲醇、乙醇、乙腈中的任意一種或二種以上，等度洗脫或梯度洗脫，洗脫體積為柱體積的1倍到20倍體積之間。

7.如權利要求1所述的裝置，其特征是，所述第一液泵流出的流動相等度洗脫第一色譜柱；所述第二液泵流出的流動相等度洗脫或梯度洗脫第二色譜柱。

8.如權利要求1所述的一種二維液相色譜純化植物多糖的方法及其裝置，其特征是，所述第一色譜柱上樣量為裝填填料量的千分之一至百分之一。

9.一種二維液相色譜純化植物多糖的方法，采用權利要求1-8任一所述的裝置，其具體步驟包括：

(1)植物多糖提取，獲得提取液，預處理脫蛋白脫色；

(2)提取液上樣到二維液相色譜蛋白純化裝置的第一色譜柱；

(3)洗脫第一色譜柱，依據檢測器切換閥，捕集柱捕集；

(4)洗脫捕集柱，捕集柱中的目標物上樣到第二色譜柱；

(5)洗脫第一色譜柱，依據檢測器，收集器自動收集目標物；

(6)干燥得到產品。