[發明專利]一種藕節與藕節炭的特征圖譜構建方法及鑒別方法

在審

• 申請號: 202011610874.0
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112782331A
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: 周厚成;胡昌江;鐘磊;汪席敏;劉珂;張開元
• 申請（專利權）人: 四川新綠色藥業科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 成都天嘉專利事務所(普通合伙) 51211
• 代理人: 向丹

本發明公開了一種藕節與藕節炭的特征圖譜構建方法及鑒別方法，通過分別構建藕節及藕節炭的標準特征圖譜，根據其標準特征圖譜中5?羥甲基糠醛（5?HMP）等對應特征峰的區別，可以將其應用于藕節及藕節炭的專屬鑒別，具有快速、準確的特點。

技術領域

本發明是一種藕節與藕節炭的特征圖譜構建方法及鑒別方法，具體涉及一種藕節與藕節炭飲片、藕節炭對照提取物、藕節炭配方顆粒的特征圖譜的構建及其鑒別方法，屬于中藥檢測技術領域。

背景技術

藕節為睡蓮科植物蓮(Nelumbo nucifera Gaertn.)的干燥根莖節部經去雜，洗凈，干燥而制成，具有止血、消淤的作用，用于治療吐血、咯血、尿血、衄血、崩漏等癥。藕節炭為藕節經炒炭法炒至表面黑褐色或焦黑色，內部黃褐色或棕褐色的炮制品，具有收斂止血，化瘀的功效，可用于吐血、咯血、忸血、尿血、崩漏等癥。

在藕節及藕節炭的臨床應用中，有生用或炒炭用，并認為生用涼血止血，兼能化瘀。炒炭增強收斂之性，故止血作用增強。因此，基于其臨床效果的區別，為促進藕節及藕節炭在中藥制劑中的開發和應用，勢必需要建立對藕節及藕節炭的質量標準的參考依據。

劉善新等在“藕節的TLC鑒別和浸出物含量測定”和“藕節炭的TLC鑒別和浸出物含量測定”中分別對藕節、藕節炭藥材的鑒別方法及浸出物進行了研究，采用薄層色譜法(TLC)分別對藕節、藕節炭藥材進行鑒別研究，用65％乙醇測其浸出物，其薄層鑒別斑點明顯，因此，以3-表白樺脂酸、β-谷甾醇為對照可以分別鑒別藕節、藕節炭藥材，但不同地區市售藕節、藕節炭65％乙醇浸出物差異較大。

除薄層色譜法外，劉善新等在“藕節、藕節炭HPLC指紋圖譜研究”中還建立了藕節、藕節炭HPLC指紋圖譜共有模式，以3-表白樺脂酸為對照，采用Lichrospher C₁₈柱4.6mm×150mm，5μm色譜柱，乙腈-0.2％磷酸為流動相梯度脫洗，柱溫30℃，流速1ml/min，檢測波長203nm，分析時間70min。檢測結果顯示，藕節、藕節炭分別獲得5個、4個共有指紋峰，同時標定了3-表白樺脂酸的位置。該方法操作簡便，精密度、穩定度、重現性良好，為藕節、藕節炭的質量控制提供了新的參考。

基于上述情況可以知道，現有針對藕節及藕節炭的專屬鑒別方法尚未見報道，為此，本發明應運而生。

發明內容

為實現藕節與藕節炭的快速鑒別，本發明提供了一種藕節與藕節炭的特征圖譜構建方法及鑒別方法，通過分別構建藕節及藕節炭的標準特征圖譜，根據其標準特征圖譜中5-羥甲基糠醛(5-HMP)等對應特征峰的區別，可以將其應用于藕節及藕節炭的專屬鑒別，具有快速、準確的特點。

本發明通過下述技術方案實現：一種藕節與藕節炭的特征圖譜構建方法，包括以下步驟：

A.分別取藕節和藕節炭，制備得到藕節供試品溶液和藕節炭供試品溶液；

B.分別取藕節供試品溶液和藕節炭供試品溶液，按高效液相色譜法進行測定，得到對應的標準特征圖譜。

所述步驟A中，供試品溶液的制備方法包括：取藕節或藕節炭，加入70％甲醇25ml，超聲處理20～30min，放冷，濾過，即得。

所述步驟B中，按高效液相色譜法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇為流動相A，0.1％磷酸溶液為流動相B，進行梯度洗脫，在流速為1.0ml/min，柱溫為35℃，檢測波長為275nm的條件下進行測定。

所述梯度脫洗滿足以下條件：

0～60min，流動相A：5％→90％，流動相B：95％→10％。

一種藕節與藕節炭的特征圖譜鑒別方法，包括以下步驟：

A.采用權利要求1所述方法構建得到藕節和藕節炭的標準特征圖譜；