[發(fā)明專利]一種金線蓮有效成分的檢測及分析方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011609525.7
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112816577A
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉婷婷
• 申請（專利權(quán)）人: 聯(lián)和東浩（廈門）藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/72;G01N21/33
• 代理公司: 深圳中創(chuàng)智財知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44553
• 代理人: 陳慧

1.一種金線蓮有效成分的測定與分析方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

制備提取液：選取新鮮的金線蓮，將選取的金線蓮進行水洗并晾干至葉片萎謝；

將晾干后的金線蓮在真空環(huán)境下微波干燥；

將經(jīng)過微波干燥后的金線蓮進行粉碎，將粉碎后的金線蓮加入蒸餾水，對物質(zhì)進行分離提純，得到提純液體；

將得到的提純液體進行超聲波提取，得到金線蓮提取液；

黃酮分析測定：取部分上述金線蓮提取液，采用高效液相色譜和液質(zhì)聯(lián)用高分辨電噴霧質(zhì)譜檢測分析，獲得金線蓮提取液中黃酮化合物的可能存在的種類；

將推測的黃酮化合物的保留時間和紫外吸收光譜分別與標準品黃酮化合物的保留時間和紫外吸收光譜進行對比，確定金線蓮提取液黃酮化合物的種類；

揮發(fā)油分析測定：采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對金線蓮進行檢測分析，所述色譜條件為：載氣為氦氣，進樣量為1，傳輸線溫度設(shè)為250℃，分流比1：10，升溫程序設(shè)定如下：初始溫度為50℃，以5℃/min升至200℃，然后再以1℃/min升至220℃，流速設(shè)為1.0mL/min。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括生物堿的分析測定：

標準曲線的繪制：取生物堿標準品用甲醇溶解制成標準溶液；利用標準溶液繪制標準曲線；

測定：吸取所述金線蓮提取液進行色譜梯度洗脫；然后根據(jù)色譜梯度洗脫確定目標物質(zhì)母離子后進行質(zhì)譜掃描，得到金線蓮提取液中生物堿含量的測定值。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在微波干燥的過程中引入緩蘇工藝，所述緩蘇工藝中的初始干基含水率為250％，緩蘇時間為210分鐘。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述微波干燥的真空條件為：真空度為-70KPa。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜的色譜柱為C18反向色譜柱，所述色譜柱的直徑為4.5mm，高度為200mm，所述C18反向色譜柱的填料粒徑為3μm。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，生物堿標準品用甲醇的比例溶解制成1mg/ml標準儲備液，然后將標準儲備液用含有甲酸的甲醇水稀釋成4ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、40ng/ml、100ng/ml、200ng/ml的標準工作溶液；然后用各生物堿測定所得的峰面積與標準工作溶液的濃度繪制標準曲線。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述金線蓮提取液包括有效物質(zhì)包括以下物質(zhì)：黃酮類、多糖、揮發(fā)油、有機酸、三萜類、生物堿、甾醇。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述質(zhì)譜條件為EI電離源，電子轟擊離子化電壓為70eV，m/z50-500，離子源溫度為230℃。