[發明專利]一種基于核糖體28s基因檢測桑輪斑病的方法

有效

• 申請號: 202011607776.1
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112553219B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 劉吉平;羅龍輝;黃裕鑫;孟芳
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

本發明屬于植物病原與病害檢測技術領域，具體涉及一種基于核糖體28s基因檢測桑輪斑病的方法。本發明首先提供了一種可實現桑輪斑病特異檢測的核糖體28s基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，該基因對于桑輪斑病的分子診斷檢測具有重要的應用價值和意義；本發明還根據該基因還設計了桑輪斑病的PCR檢測引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2～3所示，該引物特異性好，并基于該引物建立了優化的檢測方法，檢測所需時間短、快速、高效，在檢測桑輪斑病中具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于植物病原與病害檢測技術領域。更具體地，涉及一種基于核糖體28s基因檢測桑輪斑病的方法。

背景技術

桑輪斑病是最早在1978年于高知縣發現的桑樹新病害，為害桑葉。據查有關資料，我國臺灣省、廣西省有過報導。近些年在江西省修水縣蠶種場，以及廣西的部分蠶區發現了桑輪斑病并呈較快的趨勢蔓延，影響了廣大蠶農經濟效益和從事養蠶業的積極性。

桑樹輪斑病一般發生在7～8月間，首先危害枝條的下位葉，在桑葉病斑擴大的同時，擴展到危害枝條的上位葉；桑葉病斑初期為褐色水漬狀同心輪斑斑點(直徑1～6cm)，隨著病情的加劇，直徑可達10cm，桑葉病斑中心往往破裂變成孔洞，導致飼料價值降低，中秋蠶和晚秋蠶受害嚴重。

目前尚未有有效的防控手段，早期監測顯得更加尤為重要。但是目前也尚未建立相應的檢測方法，桑輪斑病導致的蠶區經濟效益降低日益嚴重，因此，亟需建立一種可對桑樹輪斑病的病原菌進行檢測和鑒定的方法，以便于做好早期防控。

發明內容

本發明要解決的技術問題是彌補現有桑輪斑病檢測技術的空白，提供一種基于核糖體28s基因檢測桑輪斑病的檢測手段。

本發明的目的是提供一種桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.的核糖體28s基因。

本發明的另一目的是提供所述核糖體28s基因和/或其檢測試劑在檢測桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.中的應用。

本發明的再一目的是提供所述核糖體28s基因在制備桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.檢測試劑和/或檢測產品中的應用。

本發明的再一目的是提供一種檢測桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermumsp.的引物組。

本發明的再一目的是提供所述引物組在檢測桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.中的應用。

本發明的再一目的是提供所述引物組在制備桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.檢測試劑盒中的應用。

本發明的再一目的是提供一種桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.的檢測試劑盒。

本發明的再一目的是提供一種檢測桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermumsp.的方法。

本發明上述目的通過以下技術方案實現：

本發明通過高通量測序的手段，對桑輪斑病樣本的測序結果進行組裝及基因的注釋，經數據庫比對之后，篩選輪斑病病原菌Acrospermum sp.的核糖體28s基因，能夠實現桑輪斑病的特異檢測，其基因序列如SEQ ID NO.1所示。

因此，本發明要求保護一種桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.的核糖體28s基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

以及要求保護所述核糖體28s基因和/或其檢測試劑在檢測桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.中的應用。

所述核糖體28s基因在制備桑輪斑病和/或桑輪斑病病原菌Acrospermum sp.檢測試劑和/或檢測產品中的應用，也屬于本發明的保護范圍之內。