[發明專利]IRG1單克隆抗體及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 202011607460.2
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112626033B
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發明（設計）人: 王樹瓏
• 申請（專利權）人: 江蘇親科生物研究中心有限公司
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/40;G01N33/577;G01N33/573
• 代理公司: 常州市權航專利代理有限公司 32280
• 代理人: 黃晶晶

本發明提供一種IRG1單克隆抗體及其制備方法和用途。本發明采用保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC No.21098的雜交瘤細胞制備IRG1單克隆抗體，可用于檢測樣品中的IRG1。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別是涉及IRG1單克隆抗體及其制備方法和用途。

背景技術

IRG1蛋白在天然免疫過程中發揮重要作用,研究表明，多種病原微生物感染均會上調 IRG1蛋白的表達(Differential innate immune response programs in neuronalsubtypes determine susceptibility to infection in the brain by positivestranded RNA viruses.Nat Med.2013 Apr，19(4):458-64)。但是目前市場上沒有抗IRG1的單克隆抗體。

發明內容

鑒于以上所述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種IRG1單克隆抗體及其制備方法和用途，填補現有技術的空白。

本發明一方面提供了雜交瘤細胞株HOO56-IRG1,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC No.21098。

本發明另一方面提供通過上述雜交瘤細胞株HOO56-IRG1分泌產生的IRG1單克隆抗體。

進一步地，所述IRG1單克隆抗體為IgG。

本發明另一方面提供IRG1單克隆抗體在用于制備檢測樣品中IRG1的制劑中用途。

進一步地，所述檢測是為免疫印跡法或者免疫組化分析法。

本發明另一方面提供了一種檢測樣品中IRG1的試劑盒，所述試劑盒中含有上述IRG1單克隆抗體。

本發明另一方面提供了上述IRG1單克隆抗體的制備方法，所述方法包括以下步驟：

1)提供免疫原：采用氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的多肽作為免疫原并與載體蛋白交聯獲得交聯免疫原；

2)制備雜交瘤細胞：用交聯的免疫原免疫動物，取免疫動物的脾臟與小鼠骨髓瘤細胞融合制備雜交瘤細胞并培養；

3)制備單克隆抗體：將雜交瘤細胞，打入小鼠腹腔內，從腹水中提取單克隆抗體。

進一步地，載體蛋白為匙孔血藍蛋白(KLH)或牛血清白蛋白(BSA)。

進一步地，所述交聯免疫原與免疫佐劑混合乳化后，在小鼠背部通過多點皮下注射，并經二次以上加強免疫，血清的效價大于1∶10000。

進一步地，所述提取單克隆抗體的方法為現有技術，本領域技術人員可以通過現有知識知曉如何提取。

進一步地，所述方法包括步驟4)對單克隆抗體進行純化。

進一步地，所述純化包括蛋白A親和純化以及肽親和純化。

如上所述，本發明的IRG1單克隆抗體及其制備方法和用途，具有以下有益效果：

本發明提供的IRG1單克隆抗體能夠有效的識別IRG1。

細胞名稱：雜交瘤細胞株

保藏時間：2020年12月04日

保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心

保藏編號：CGMCC No.21098

保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號

附圖說明