[發(fā)明專利]MRKH綜合征的診斷標記物及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011606691.1
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112501284B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發(fā)明（設計）人: 朱蘭;陳娜;吳南;趙森;田維杰
• 申請（專利權）人: 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 孟祥斌

本發(fā)明公開了MRKH綜合征的診斷標記物及其應用，所述診斷標記物為一組MRKH綜合征相關的攜帶有突變位點的致病基因。本發(fā)明的研究利用全外顯子組測序分析，首次在世界范圍內發(fā)現了MRKH綜合征罕見病患者的PAX8基因上存在如下突變位點：c.136GA、c.266TC、c.619CT、c.727CG，TBX6基因上存在如下突變位點：c.275_287dupTGGAGGAGGGCGG、c.621+1GA。經實驗驗證，攜帶有上述突變位點的基因可作為MRKH綜合征的診斷標記物，用于診斷患者是否患有MRKH綜合征，為下一步臨床早期診斷MRKH綜合征提供了科學依據。

技術領域

本發(fā)明屬于MRKH綜合征罕見病領域，具體而言，涉及一組MRKH綜合征的診斷標記物及其應用。

背景技術

在胚胎發(fā)育過程中，胚胎的未分化期，男女兩性都各具有兩套生殖管：中腎管(沃爾夫管)和副中腎管(苗勒氏管)。在胚胎發(fā)育的第6周，中腎管由于缺乏雄激素逐漸退化，副中腎管充分開始發(fā)育，女性生殖管道的發(fā)生和演變開始，中腎旁管的上段、中段將逐漸分化形成輸卵管；中腎旁管兩側的下段將在中央愈合形成子宮及陰道上2/3；陰道下1/3的部分則由泌尿生殖竇后壁的竇結節(jié)增生而成的陰道板形成。陰道板起初是實心的結構，在胚胎第5個月時演變成管道，內端與子宮相通。MRKH(Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser)綜合征是由胚胎期的副中腎管和泌尿生殖竇發(fā)育異常而導致的生殖系統(tǒng)結構缺陷，發(fā)病率約為女性新生兒的1/4500。患者的外陰正常，陰道和子宮不發(fā)育(或僅有始基子宮)，雙側卵巢和輸卵管多正常，染色體核型正常為46，XX，具有女性的第二性征。MRKH綜合征患者中35％-45％合并一側腎臟缺如，10％-30％合并脊柱畸形，少數合并心臟、中耳或肢端的發(fā)育畸形，如肺動脈瓣狹窄、法洛四聯(lián)癥、傳導性耳聾、橈骨缺如綜合征等。患者在青春期后無月經來潮，無正常性生活，不具生育能力，只能通過人工陰道成形手術來解決患者的性生活障礙。因此，MRKH綜合征的病因學研究始終是國際婦產科學界關注和探索的熱點。

目前，導致MRKH綜合征的確切病因仍然尚未明確，大部分的MRKH綜合征患者為散發(fā)存在的，部分患者存在一定程度的家庭聚集傾向，越來越多的學者認為MRKH綜合征是一類由多基因/多因素聯(lián)合導致的先天性疾病，且遺傳因素為主要的致病原因。苗勒氏管能正常的形成、分化及發(fā)育，是由許多基因在不同時間及空間共同參與、共同調節(jié)的結果。在既往的研究中，國內外學者們已發(fā)現許多基因可能參與苗勒氏管的發(fā)育，這些基因也被列為導致苗勒氏管發(fā)育異常的候選基因。包括研究比較多的WNT家族基因(WNT4、WNT5A、WNT7A、WNT9B)和HOX家族基因(HOXA7、HOXA9、HOXA10、HOXA11、HOXA13)，以及LHX1、PBX1、EMX2基因等，但是，目前仍然缺乏對上述可能致病基因中的突變位點的研究。本發(fā)明針對目前本領域存在的技術問題，以我國和其他混合種族的MRKH綜合征患者樣本為材料，通過對大規(guī)模MRKH綜合征病例和對照的基因進行檢測，發(fā)現了致病基因PAX8和TBX6上的突變位點，包括帶有突變位點c.136GA的PAX8基因、帶有突變位點c.266TC的PAX8基因、帶有突變位點c.619CT的PAX8基因、帶有突變位點c.727CG的PAX8基因、帶有突變位點c.275_287dupTGGAGGAGGGCGG的TBX6基因、帶有突變位點c.621+1GA的TBX6基因，本發(fā)明的提出為下一步早期診斷MRKH綜合征提供了科學依據。

發(fā)明內容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一組MRKH綜合征的診斷標記物及其在診斷MRKH綜合征中的應用，本發(fā)明的發(fā)明人通過對大規(guī)模的樣本進行研究，發(fā)現了致病基因PAX8和TBX6上的6個突變位點，該發(fā)現為下一步早期診斷MRKH綜合征提供了科學依據。

本發(fā)明通過對大樣本的MRKH綜合征患者以及健康女性對照組進行全外顯子測序分析，首次在PAX8基因(Genebank：NM_003466.3)和TBX6基因(Genebank：NM_004608.3)上發(fā)現了一組突變位點。