[發明專利]一種檢測三甲胺或三甲胺鹽含量的方法

在審

• 申請號: 202011605165.3
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN114689715A
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發明（設計）人: 陳艷明;趙亮東;冷玉歡;倪成良;周明華;馬俊凱
• 申請（專利權）人: 北京海湞醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/64;G01N30/72;G01N30/96
• 代理公司: 北京坦路來專利代理有限公司 11652
• 代理人: 汪送來

一種高靈敏度檢測三甲胺或三甲胺鹽的方法，包括：向裝有待測物的容器中加入堿性溶液和/或加熱所述容器中的內容物和/或向所述容器中的內容物中通入不與待測物組分發生化學反應的氣體，并使所述容器中的氣體連通于酸性溶液中，測定酸性溶液中獲得的三甲胺或三甲胺鹽的量，求出待測物中三甲胺或三甲胺鹽的含量。該方法是一種靈敏度高、準確度高、低成本的檢測方法。為例如左卡尼汀制品中三甲胺或三甲胺鹽雜質質量控制解決了技術難題。

技術領域

本發明涉及醫藥分析的技術領域，涉及三甲胺或三甲胺鹽含量的測定方法，尤其是檢測含左卡尼汀(左旋肉堿)的藥品、保健品、食品或添加劑中三甲胺或三甲胺鹽含量的方法。

背景技術

許多藥品、保健食品、食品及添加劑等都含有左卡尼汀(左旋肉堿)，左卡尼汀極易降解成三甲胺或者三甲胺的鹽。

三甲胺攝入人體后會增加患者患心血管疾病和腎病的風險，且三甲胺還是致癌物亞硝胺的前體化合物，被攝入人體后，經肝代謝轉化為氧化三甲胺，氧化三甲胺是導致心血管疾病增加風險之一[Roberts,A.B.,Gu,X.,Buffa,J.A.,et al.Development of a gutmicrobe–targeted nonlethal therapeutic to inhibit thrombosis potential.NatureMedicine.,2018,24:1407-1417；Zehua Li,Zhiye Wu,Jianyun Yan,et al.Gut microbe-derived metabolite trimethylamine N-oxide induces cardiac hypertrophy andfibrosis.Lab Invest,.2019,99(3):346-357]。

歐盟原料藥委員會(APIC)在其發布的《原料藥工廠中清潔驗證指南》(Guidanceon aspects of cleaning validation in active pharmaceutical ingredient plants)中，NOEL＝LD₅₀/2000；在ICH Q3C殘留溶劑中，PDE＝NO(A)EL x體重調整/[F1 x F2x F3 xF4 x F5]；按照公式計算，AET＝PDE/每日最大劑量。

多數發達國家衛生組織均規定了三甲胺的職業衛生暴露限量標準，其時間加權平均限量值(TWA)一般在1～10ppm之間。

我國部分食品有關的國家標準或行業標準中，規定了應檢查三甲胺的含量，如GB2730-2015食品安全國家標準中三甲胺的含量限量標準為2.5mg/100g(相當于25ppm)。

左卡尼汀注射液，一般用于治療慢性腎衰長期血透病人因繼發性肉堿缺乏產生的一系列并發癥狀，臨床表現如心肌病、骨骼肌病、心律失常、高脂血癥，以及低血壓和透析中肌痙攣等。

左卡尼汀中的主要雜質包括三甲胺和2(5H)-呋喃酮。2(5H)-呋喃酮的毒性極低，無致癌或致畸變活性，可按照未知雜質進行控制。左卡尼汀注射液小鼠腹膜(腔)注射給藥的半數致死率數據LD₅₀＝90mg/kg(美國CDC給出的毒理學數據)，按左卡尼汀注射液每日最大劑量3g計算，三甲胺限度為6.25ppm，考慮到三甲胺(trimethylamine，TMA)不僅有毒，且在吸入過程中對人體的眼、鼻、咽喉和呼吸道的刺激作用，需要嚴格其限度，根據計算，將三甲胺的限度規定為不得超過5ppm。

按照相關毒理學數據計算，左卡尼汀注射液中三甲胺的限度應不超過4.38ppm。

然而，通常的揮發胺類(三甲胺即為一種揮發胺)檢測方法，不適用于某些成品例如含左卡尼汀(左旋肉堿)的藥品、保健品、食品或添加劑中三甲胺或三甲胺鹽含量的檢測。目前，這類成品中三甲胺或三甲胺鹽含量的檢測存在很大的技術困難。

發明內容

發明人經深入研究，實現了一種高靈敏度檢測三甲胺或三甲胺鹽含量的方法，克服了目前存在的技術難題。