[發明專利]一種葡糖淀粉酶的生產方法

有效

• 申請號: 202011605129.7
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112553181B
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發明（設計）人: 馮玉枚;馬良;向斌;曾佳
• 申請（專利權）人: 宜昌東陽光生化制藥有限公司
• 主分類號: C12N9/34
• 分類號: C12N9/34;C12N1/14;C12R1/685
• 代理公司: 宜昌市慧宜專利商標代理事務所(特殊普通合伙) 42226
• 代理人: 夏冬玲

1.一種葡糖淀粉酶的生產方法，其特征在于，葡糖淀粉酶的生產過程中采用槐糖補料來補充發酵液中的碳源，其槐糖中三糖的濃度為：總糖47g/100ml-65g/100ml；還原糖40g/100ml-55 g/100ml；葡萄糖38g/100ml-50 g/100ml；葡糖淀粉酶的生產菌為黑曲霉。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：采用槐糖補料過程中，控制發酵液中的還原糖濃度0.7-1.2g/100ml，槐糖的補料速率控制在3.5g/L/h-7.0 g/L/h。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：葡糖淀粉酶的生產過程中，控制溶氧不低于20%。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：槐糖補料過程具體操作為：待葡糖淀粉酶發酵培養基中糊精耗盡開始啟補糖（槐糖）速率2.0 g/L/h，在啟補糖后的10-15h內提高補糖速率至7.0g/L/h，90-120h后發酵液中還原糖的含量高于1.2g/100ml或溶氧低于20%，則梯度減糖至3.5g/L/h，維持發酵液中的還原糖濃度0.7-1.2g/100ml。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法具體包括以下步驟：

①菌種活化：將葡糖淀粉酶生產菌的菌落接于活化培養基中，培養2.5-3.5d，得到活化培養液；

②種子一級培養：將步驟①所得活化培養液500ml-800ml接入100L種子培養基，培養50h-80h，得到種子培養液；

③種子二級培養：將步驟②所得種子培養液擴大至1500L二級種子培養基，培養30h-45h得到二級種子液；

④葡糖淀粉酶發酵培養：將步驟③所得二級種子液接于10m3葡糖淀粉酶發酵培養基中，培養140h-170h。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法包括以下培養基：

活化培養基：為每1L水中含糊精220-330g、玉米漿20-40g、硫酸銨20-40g、pH4.0-4.5；

種子培養基：為1L水中含糊精190-330g、玉米漿20-40g、硫酸銨20-40g、pH4.5-5.0；

二級種子培養基：為1L水中含糊精170-360g、玉米漿20-40g、硫酸銨20-40g、pH4.5-5.0；

葡糖淀粉酶發酵培養基：為1L水中含糊精130-300g、玉米漿40-70g、硫酸銨20-40g、豆粕粉5g-20g、pH4.5-5.0。